《靶向EGFR的新型磁共振成像對比劑實驗研究》是依託華中科技大學，由楊帆擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：靶向EGFR的新型磁共振成像對比劑實驗研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：楊帆
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
人表皮生長因子受體過表達存在於乳腺癌等許多惡性腫瘤的細胞中，明確該受體表達狀態對於乳腺癌的診斷、靶向治療和預後評價至關重要。儘管基於Gd-DTPA的動態增強MRI技術已成為乳腺癌的重要檢查手段，但仍存在特異性和敏感性不高等問題。為了解決該難題，基於配體-受體反應特異性的原理，以課題組前期關於腫瘤分子靶向性藥物和受體靶向型造影劑前期研究為基礎，將釓配合物Gd-DO3A與配體活性肽(CMYIEALDKYAC，EBP)偶聯，合成出新型受體靶向性對比劑EBP-Gd-DO3A。本課題擬開展體外細胞EBP-Gd-DO3A結合試驗、結合抑制試驗、磁共振成像試驗和磁共振成像抑制試驗，以及動物體內急性毒性試驗和腫瘤磁共振成像試驗。旨在進一步探討該對比劑的作用機理、尋靶能力及組織成像能力，為評價該對比劑用於活體腫瘤成像的可行性提供依據，也為構建能提高腫瘤成像特異性和敏感性的對比劑打下基礎。
結題摘要
背景：目前MRI檢查使用的造影劑Gd-DO3A存在組織特異性低、體內停留時間短等缺點。本研究以細胞表皮生長因子受體（EGFR）為靶標，將EGFR的配體活性片段（EGFR結合肽：EBP）與Gd-DO3A連線，構建靶向EGFR高表達腫瘤細胞的EBP-Gd-DO3A，以提高腫瘤檢測的敏感性與特異性。研究內容：通過化學方法將EBP與Gd-DO3A共價連線，製備出EBP-Gd-DO3A；套用表面等離子共振技術，對EBP-Gd-DO3A和EGFR之間的結合能力進行了檢測，從分子水平上分析EBP-Gd-DO3A靶向EGFR活性；將EBP-Gd-DO3A作用於高、低不同EGFR 表達水平的腫瘤細胞，觀察細胞結合EBP-Gd-DO3A是否與EGFR表達水平有關，同時，採用EGFR抑制劑後，再用EBP-Gd-DO3A作用於腫瘤細胞，判斷抑制劑是否影響對EBP-Gd-DO3A 與細胞EGFR的結合，從細胞水平上揭示EBP-Gd-DO3A靶向EGFR的特異性；觀察EBP-Gd-DO3A 對動物的急性毒性反應，計算EBP-Gd-DO3A 的半數致死量和最大耐受劑量；靜脈注射EBP-Gd-DO3A到乳腺癌移植瘤動物後，在不同的時間點上進行MRI檢測，對比瘤體內的信號強度，從動物水平上探討EBP-Gd-DO3A 作為新型MRI造影劑的可行性。結果：EBP-Gd-DO3A工藝可靠，質量穩定；體外EBP-Gd-DO3A與EGFR結合試驗，表明兩者之間存在特異性相互作用；體外細胞試驗，顯示細胞結合EBP-Gd-DO3A的水平，與細胞EGFR表達水平呈明顯正相關，說明EBP-Gd-DO3A具有靶向細胞EGFR作用。此外，在EGFR抑制劑作用下，細胞結合EBP-Gd-DO3A被明顯抑制，表明EBP-Gd-DO3A與細胞的結合通過EGFR介導；通過動物毒性試驗，取得EBP-Gd-DO3A 的半數致死量和最大耐受劑量，計算出動物暴露量，證實安全性高；在乳腺癌移植瘤動物套用EBP-Gd-DO3A後，MRI檢測實驗組瘤體信號強度升高明顯。意義：本項研究表明，構建靶向 EGFR 的新型磁共振成像對比劑，有望成為具有腫瘤特異性的高效、低毒MRI造影劑。
