《靶向DNA甲基化閱讀器治療T-ALL的效應及分子機制研究》是依託華中科技大學,由周匡果擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名:靶向DNA甲基化閱讀器治療T-ALL的效應及分子機制研究
- 項目類別:青年科學基金項目
- 項目負責人:周匡果
- 依託單位:華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
T-ALL是一種高度侵襲且易復發的白血病,目前尚缺乏高效低毒的靶向藥物。新一代測序技術顯示T-ALL患者具有獨特的甲基化圖譜,提示DNA甲基化可能在T-ALL發病中起關鍵作用。MBD2蛋白是識別特定DNA甲基化信息的重要媒介,與傳統的DNA甲基轉移酶抑制劑相比,阻斷MBD2的讀取功能,是干預DNA甲基化調控的全新思路。本項目組前期研究也表明MBD2可能參與T-ALL的發病。基於此,我們提出:靶向甲基化閱讀器MBD2,可能為治療T-ALL提供新的切入點。本研究利用MBD2敲除小鼠,從造血重建及微環境上探索MBD2對T細胞分化發育的基因表達模式的作用;同時通過逆轉錄病毒構建T-ALL小鼠模型,揭示MBD2敲除對小鼠白血病發生髮展的影響。並利用基因晶片和生物信息學,結合臨床標本,發掘在T-ALL發病和T細胞分化中受DNA甲基化調控的關鍵基因或信號通路,為高效低毒地治療T-ALL開闢新的方向。
結題摘要
背景:T-ALL是一種高度侵襲且易復發的白血病,目前尚缺乏高效低毒的靶向藥物。新一代測序技術顯示T-ALL患者具有獨特的甲基化圖譜,提示DNA甲基化可能在T-ALL發病中起關鍵作用。靶向DNA甲基化治療已經在多種腫瘤中取得了突出的療效。MBD2蛋白是識別特定DNA甲基化信息的重要媒介,與傳統的DNA甲基轉移酶抑制劑相比,阻斷MBD2的讀取功能,是干預DNA甲基化調控的全新思路。 結果:本研究利用MBD2敲除小鼠,探索MBD2對T細胞分化發育及急性T淋巴細胞性白血病中的作用。發現MBD2敲除後,小鼠HSC自我更新能力下降,但不影響HSC的數量和比例;外周血T和B淋巴細胞減少;小鼠T細胞在胸腺DN階段的分化受阻,通過下調TCF7來抑制Wnt通路的活性。同時通過逆轉錄病毒構建T-ALL小鼠模型,利用基因晶片和生物信息學,揭示MBD2敲除後可能促使Wnt通路抑制分子的表達上調,導致核內β-catenin降低,最終引起Wnt通路活性下降,進而影響到了白血病細胞的增殖和周期,延緩白血病發病。同時,利用甲基化測序發現在T-ALL臨床標本中,一系列的Wnt通路上游抑制分子處於高甲基化狀態。並在174例成人T-ALL臨床樣本中,通過GSEA富集及Pearson相關性分析揭示Wnt通路與MBD2表達存在明顯的正相關關係。此外,利用CRISPR/Cas9技術建立人T-ALL細胞系MBD2敲除模型,發現MBD2敲除後,Jurkat細胞惡性程度亦減低,Wnt下游公認的關鍵激活標誌β-catenin蛋白的總蛋白和核蛋白表達亦隨著MBD2敲除而下降,與小鼠結論相符合。 綜上所述,靶向阻斷MBD2,使T細胞發育在DN階段出現了分化阻滯,且在T-ALL白血病中,敲除MBD2阻斷了Wnt通路抑制分子的高甲基化狀態的讀取,使高甲基化的腫瘤抑制基因表達上升,並影響其下游靶分子的表達,從而延緩白血病的發生髮展,為高效低毒地治療T-ALL開闢新的方向。