《靶向細胞周期蛋白依賴性激酶11通路對骨肉瘤細胞的作用》是依託鄭州大學，由段震峰擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：靶向細胞周期蛋白依賴性激酶11通路對骨肉瘤細胞的作用
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：段震峰
- 依託單位：鄭州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
骨肉瘤的標準治療方案包括手術治療和化學治療。但仍有20-40%的患者在接受手術和化學治療後臨床預後仍然較差。因此，尋找新的靶向治療方案對於改善骨肉瘤患者的生存率很關鍵。目前有很多的關於激酶表達與腫瘤相關的研究，發現抑制激酶能夠顯著改善某些腫瘤的治療。近幾年，我們和其他研究人員通過激酶高通量篩選RNA干擾技術，發現細胞周期蛋白依賴性激酶11（CDK11）的表達對腫瘤的生長增殖起關鍵作用。CDK11的表達水平與骨肉瘤患者的臨床預後顯著相關，體內實驗表明沉默CDK11能夠顯著抑制腫瘤的生長。本研究的目標是：（1）分析CDK11信號通路在骨肉瘤中的作用；（2）篩選鑑定能夠抑制骨肉瘤細胞增殖的CDK11激酶小分子抑制劑；（3）評價CDK11激酶特異性抑制劑在骨肉瘤小鼠模型中的抗腫瘤作用。我們的長期目標是闡釋CDK11表達的調控機制並最終研發CDK11的抑制劑，使其能夠改善骨肉瘤及其他腫瘤的治療。
結題摘要
骨肉瘤的標準治療方案包括手術治療和化學治療，但仍有20-40%的患者在接受手術和化學治療後臨床預後仍然較差。尋找新的靶向治療方案對於改善骨肉瘤患者的生存率很關鍵。目前有很多的關於激酶表達與腫瘤相關的研究，抑制激酶能夠顯著改善某些腫瘤的治療。我們通過激酶高通量篩選RNA干擾，CRISPR-Cas9等技術，發現細胞周期蛋白依賴性激酶11（CDK11）的表達對腫瘤的生長增殖起關鍵作用。CDK11的表達水平與骨肉瘤患者的臨床預後顯著相關，體內實驗表明沉默CDK11能夠顯著抑制腫瘤的生長。因此，我們申請國家自然科學基金面上項目，進一步分析CDK11信號通路在骨肉瘤中的作用，篩選鑑定能夠抑制骨肉瘤細胞增殖的CDK11激酶小分子抑制劑，評價CDK11激酶特異性抑制劑在骨肉瘤小鼠模型中的抗腫瘤作用。旨在闡釋CDK11表達的調控機制並最終研發CDK11的抑制劑，使其能夠改善骨肉瘤及其他腫瘤的治療。CDK11p110和CDK11p58異構體分別位於細胞核和細胞漿：CDK11 基因位於染色體 1p36.33，編碼CDK11p110和CDK11p58兩種異構體。我們研究了兩種異構體的亞細胞定位。不同 CDK11 異構體基因分別於綠色螢光蛋GFP基因融合併克隆到真核表達載體，轉染腫瘤細胞後，表達的CDK11p110蛋白主要位於細胞核內，而表達CDK11p58主要定位於細胞漿。此外，CDK11p110在多種腫瘤細胞中高表達。 CDK11p110蛋白也主要定位在腫瘤組織的細胞核。這些結果表明，腫瘤細胞的生長增殖依賴於CDK11p110異構體。篩選到潛在的CDK11小分子抑制劑： 我們篩選了一個含有500種激酶抑制劑的小分子化合物庫，採用ATP/NADH耦合方法，我們已篩選到潛在的CDK11抑制化合物。進一步在骨肉瘤細胞中測試，包括JWD047等幾個小分子化合物對CDK11有明顯的特異性抑制作用。CDK11在卵巢癌細胞增殖與生長中的作用：另外，我們研究發現CDK11也是卵巢癌細胞存活的必要基因，CDK11在卵巢癌細胞的增殖、遷移，凋亡與細胞周期調節中發揮重要作用，提示CDK11可能作為卵巢癌治療的一個潛在分子靶點。綜上，我們對CDK11在腫瘤中的作用與機制研究取得重要成果，完成了既定目標。
