《靶向性調節性ODNR01減輕心肌缺血再灌注損傷及其機制研究》是依託華中科技大學，由肖宏擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：靶向性調節性ODNR01減輕心肌缺血再灌注損傷及其機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：肖宏
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
最近的研究證實CD3+T淋巴細胞參與心肌缺血再灌注損傷（MIRI），Th1細胞分泌的IFN-γ和-γδ T/Th17細胞分泌的IL-17促進MIRI進程，其分化分別受到STAT1/4和STAT3通路調控。我們設計的調節性ODNR01通過干預STAT1/3/4磷酸化而抑制Th1和Th17細胞分化，但其對心肌組織STAT3磷酸化的抑制可能加重MIRI，即作用缺乏靶向性。本課題擬製備表面耦聯CD3單抗並載帶調節性ODNR01的免疫脂質體，即靶向性調節性ODN R01，觀察其對CD3+T細胞的靶向性、Th1和Th17細胞分化和 γδT分泌IL-17的影響；套用靶向性調節性ODN R01干預MIRI小鼠，觀察其對MIRI指標、T細胞亞群分化及炎症的影響，並通過體外實驗闡明其機制。本課題的研究可望構建一種靶向CD3+ T細胞的調控MIRI炎症的化合物，為MIRI的免疫調節和靶向治療奠定新的理論基礎。
結題摘要
最近的研究證實CD3+T淋巴細胞參與心肌缺血再灌注損傷（MIRI），Th1細胞分泌的IFN-γ和γδT/Th17細胞分泌的IL-17促進MIRI進程，其分化分別受到STAT1/4和STAT3通路調控。我們設計的調節性ODNR01通過干預STAT1/3/4磷酸化而抑制Th1和Th17細胞分化（已申請獲得發明專利），但其對心肌組織STAT3磷酸化的抑制可能加重MIRI，即作用缺乏靶向性。本課題製備了表面耦聯CD3單抗並載帶調節性ODNR01的免疫脂質體，即靶向性調節性ODNR01，並探討了靶向性調節性ODN R01在MIRI中的作用和機制。我們首先成功製備而了anti-CD3-ODN脂質體，其在體外與CD3陽性T細胞有特異性的結合能力，即具有特異性的T細胞靶向能力。我們用對照ODN1612、調節性ODNR01、靶向性調節性ODNR01分別干預MIRI模型小鼠，發現與對照ODN1612相比，調節性ODNR01能減輕小鼠MIRI，抑制心肌細胞凋亡，減少中性粒細胞趨化因子KC、MIP-2和LIX的表達，抑制中性粒細胞的浸潤，並減少促炎因子IFN-γ、TNF-α、IL-17的表達，而與調節性ODNR01相比，靶向性調節性ODNR01顯示出更好的心臟保護作用，對心肌細胞凋亡，中性粒細胞浸潤和炎症因子表達的抑制作用也更強。在探索靶向性調節性ODNR01調控MIRI的機制時我們發現靶向性調節性ODNR01對Rag1-/-（缺乏T/B淋巴細胞）小鼠的MIRI無保護作用，而給Rag1-/-回輸T細胞後靶向性調節性ODNR01對小鼠MIRI的保護作用也恢復，這說明靶向性調節性ODNR01對MIRI的保護作用依賴於T細胞。我們還闡明了靶向性調節性ODNR01調控T細胞分化的機制。我們發現靶向性調節性ODNR01抑制Th1，Th17以及γδT17的分化，其機制為抑制STAT1/3/4磷酸化，並抑制STAT1/3/4與DNA的結合活性。本課題的研究成功構建了一種靶向CD3+ T細胞的調控MIRI炎症的化合物，為MIRI的免疫調節和靶向治療提供了新的理論基礎和實驗依據。
