《青蒿素及其衍生物抗雞球蟲的分子機理》是依託揚州大學，由李金貴擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：青蒿素及其衍生物抗雞球蟲的分子機理
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李金貴
- 依託單位：揚州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
細菌通過自身一氧化氮合酶（NOS）釋放NO介導耐藥性產生途徑的發現為依賴抗生素的治療提供了新思路，青蒿素類藥物能抑制NOS而增強抗生素療效。青蒿素類藥物具有明確的抗球蟲作用但機理不明，鑒於線粒體是青蒿素髮揮抗瘧活性的重要靶位而球蟲各階段蟲體均富含線粒體且能產生自身NO。本項目擬通過細胞培養和動物試驗來研究青蒿素類藥物對蟲體NOS、入侵活力、線粒體膜S-亞硝基化以及mPTP開放等關鍵指標的分析，結合mPTP、ANT等特異抑制劑的使用，闡明藥物致蟲體線粒體損傷的信號級聯反應，確定NO-線粒體途徑在青蒿素類藥物抗球蟲活性中的潛在作用。同時聯合抗球蟲藥，研究感染細胞NOS，抗凋亡因子NF-κB、Bcl和c-FLIP以及凋亡關鍵信號分子的表達與定位，明確青蒿素類藥物通過促進感染細胞凋亡而抑制蟲體繁殖的間接機制及增效作用。本研究將為抗球蟲藥物新靶點的發現以及指導合理用藥而降低耐藥性發生提供理論依據。
結題摘要
前期研究表明ART處理柔嫩艾美耳球蟲（E. tenella）感染雞可抑制球蟲卵囊壁的形成，並抑制卵囊的孢子生殖。本項目的研究表明ART比其衍生物青蒿琥酯（ARS）和蒿甲醚（ARM）具有更好的抗球蟲作用，且毒副作用小。在體外試驗中，ARS溶解度高，故可用於體外細胞培養試驗，ARS處理細胞和子孢子2-12h均可顯著降低E. tenella子孢子對DF-1細胞的入侵率，使入侵率下降60%左右，凋亡抑制劑米酵菌酸對ARS的影響不明顯，說明青蒿琥酯抑制入侵不是通過凋亡途徑，而是改變了細胞膜上受體或蟲體膜抗原的結構。體內試驗中ART處理E. tenella感染雞可使第二代裂殖子數量明顯減少，使部分子孢子發生細胞核固縮和染色質異常；裂殖子線粒體膜電位下降(47%)而使蟲體凋亡比率增加了61.9%，同時ART處理可顯著增加感染細胞促凋亡因子（Bax，caspase-3）的表達而減少抗凋亡因子（Bcl-2）的表達，這有利於感染細胞啟動凋亡過程而減少蟲體繁殖，最終減輕感染程度。以上數據提示ART可從多個環節發揮抗球蟲作用。ART單獨使用的抗球蟲效果難以達到傳統抗球蟲的療效，與柳氮磺吡啶、二甲氧苄胺嘧啶以及癸氧喹酯聯合套用可顯示增效作用，有必要進一步最佳化劑量和配比，為臨床使用提供參考。
