附子配伍減毒的體內作用過程及機制的代謝組學研究

《附子配伍減毒的體內作用過程及機制的代謝組學研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由孫博擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：附子配伍減毒的體內作用過程及機制的代謝組學研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：孫博
• 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院

中文摘要

附子是常用有毒中藥，通過與甘草和乾薑配伍達到增效減毒作用。以往研究多注重於配伍之後烏頭類生物鹼含量的變化，而對各成分在體內相互作用而導至的減毒效應研究較少。本課題擬通過採用整體動物和離體心肌細胞模型，對附子與甘草、乾薑配伍前後以及其各自毒效成分配伍前後在動物體內和細胞內的動態變化過程進行監測，同時結合綜合性的代謝組學技術手段對染毒後不同時段和狀態下的體液、組織、細胞的代謝指紋譜分析，建立毒效相關的特徵代謝譜模式，發現特徵性代謝物。綜合心功能檢測指標，病理生理指標和細胞活性指標，代謝指紋譜的改變，以及與不同狀態所對應的特徵代謝物，探討配伍減毒作用的體內生化過程和作用機理，進而對附子的配伍減毒增效作用進行闡釋。本課題的結果能夠對中藥配伍減毒機制的研究提供新的科學數據和研究思路。

結題摘要

附子是常用有毒中藥，通過與甘草和乾薑配伍達到減毒增效作用。本課題採用大鼠和大鼠乳鼠心肌細胞模型，對附子與甘草、乾薑或其代表性成分配伍前後在動物體內和細胞內的動態變化過程進行監測，同時結合綜合性的代謝組學技術對染毒後的體液、組織、細胞的代謝指紋譜分析，建立毒效相關的特徵代謝譜模式，發現特徵性代謝物。在附子、甘草配伍對大鼠毒性影響的代謝組學研究中表明，在附子與甘草配伍後，大鼠機體的代謝環境較附子組大鼠更接近於正常對照大鼠。這主要體現在，甘草對由附子引起的大鼠尿液中TMAO、肌酸/肌酐，血漿中乳酸、肌酸、葡萄糖、脂類，糞樣中琥珀酸、乙酸等代謝產物含量異常的調節上。相關受附子毒性影響顯著的代謝途徑在甘草的保護下使影響程度減小，附子與甘草配伍通過對機體內環境的調節對附子毒性具有緩解作用。在附子和甘草代表性成分新烏頭鹼和甘草次酸聯合對大鼠毒性的研究中顯示，甘草次酸對新烏頭鹼的毒性也具有緩解作用，主要體現在甘草次酸對尿液中亮氨酸/異亮氨酸、乳酸、2-酮戊二酸等代謝產物含量的調節上，多條受影響的胺基酸代謝途徑得到保護，使新烏頭鹼的毒性降低。另外，建立了細胞代謝組學系統的研究方法，並進行了烏頭類生物鹼對大鼠心肌細胞毒性作用的代謝組學研究。在給予烏頭類生物鹼後，心肌細胞中乳酸、乙酸、谷氨酸、谷氨醯胺、牛磺酸、甘氨酸含量發生明顯改變。而在6-姜酚與烏頭鹼對大鼠心肌細胞聯合給藥研究中發現，6-姜酚對細胞內牛磺酸、乳酸含量由新烏頭鹼引起的改變起到了明顯的改善作用，對烏頭鹼的毒性具有緩解作用。另外，為了緊隨國際代謝組學的研究步伐，進行了一些計畫之外的研究，包括為了考察中藥毒性對腸道菌群的影響建立了糞樣代謝組學的研究方法，並進行了烏頭鹼對大鼠毒性作用糞樣代謝組學的研究；為了最佳化檢測方法，對在核磁共振檢測中比較常見的尿樣中代謝物化學位移易漂移的問題，進行了不同緩衝液對尿液中代謝物的化學位移的影響的考察。本項目基本按原計畫完成，取得了豐富有價值的研究結果。