《重塑HDL抗氧化策略對動脈粥樣硬化的干預研究》是依託武漢大學，由喻紅擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：重塑HDL抗氧化策略對動脈粥樣硬化的干預研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：喻紅
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
血漿高密度脂蛋白(HDL)是公認的動脈粥樣硬化(As)防禦因素。氧化應激、炎症等條件可引起HDL病理性修飾，導致HDL從抗As向致As轉變。前期研究我們發現失功能性HDL以apoAI的氧化修飾、對氧磷酯酶1(PON1)水平和活性降低為突出特徵。鑒於體外實驗證實氧化的HDL及apoAI中Met氧化產物MetO可被一種特異的甲硫氨酸亞碸還原酶A（MsrA）修復，本課題擬針對性選擇HDL內在的PON1和外源的抗氧化酶MsrA，藉助慢病毒載體及骨髓造血幹細胞（HPCs）移植技術，並利用我們曾合成一種結合HDL的apoE擬肽(EpK) 結構，實現特定單核巨噬細胞中長效、穩定表達分泌性PON1或EpK-MsrA融合蛋白，以期從內、外源性抗氧化酶角度特異重塑失功能HDL的抗氧化狀態，從細胞水平和基因敲除小鼠（SRBI-/-鼠）在體水平探討HDL抗氧化的靶向性調控策略對As的防治價值。
結題摘要
血漿高密度脂蛋白(HDL)是公認的動脈粥樣硬化(As)防禦因素。但氧化應激、炎症等條件可產生致As的“失功能性”HDL。基於前期研究我們證實“失功能性” HDL的氧化修飾特徵及一種特異甲硫氨酸亞碸還原酶A(MsrA)對氧化apoAI的修復作用，本課題針對性選擇HDL內在的對氧磷酯酶1(PON1)和外源的抗氧化酶MsrA，並藉助我們曾合成一種結合HDL的apoE擬肽(EpK) 結構，成功構建慢病毒重組載體：pWPI-PON1、pWPI-Sp-EpK-hMsrA、pWPI-EpK等，從細胞水平及在體基因敲除(apoE-/-和SRBI-/-)小鼠模型上，實現長效、穩定表達分泌性PON1、EpK或EpK-MsrA蛋白，觀察對脂質代謝、血管壁局部和整體氧還狀態的調節及對As斑塊形成的干預效果。結果：①分泌性PON1、EpK或EpK-MsrA改善apoE-/-及SRBI-/- HDL的致炎性，並降低巨噬細胞內脂質積聚；② 肝臟分泌表達EpK，不改變apoE-/-小鼠血脂及脂蛋白分布，但降低血中SAA水平、抑制肝臟炎症因子TNFa和IL6的表達，顯著降低小鼠主動脈As斑塊；對EpK結構進行改造後合成一新的apoE擬肽(hEp)，則表現改善血脂水平和抗炎作用而顯著降低小鼠As斑塊；③肝臟hMsrA高表達可通過不同作用機制調節膽固醇轉運蛋白apoAI、ABCA1/G8、SR-BI、LDLR等水平、膽固醇酯化相關酶CEH、ACAT的表達水平、膽固醇膽道外排通路以及抑制TG合成，不同程度改善apoE-/-和SRBI-/-小鼠肝臟及循環的氧還狀態及炎症水平，從而顯著降低肝臟脂質沉積，阻抑小鼠As斑塊進程；④ 利用骨髓移植進行apoE-/-小鼠和SRBI-/-小鼠的Lv-EpK-MsrA的骨髓造血幹細胞(HPCs)感染與高表達，實現EpK-MsrA在單核巨噬細胞源性的分泌高表達，雖未見小鼠血脂變化，但可觀察到對血管壁細胞組成的影響及減輕As斑塊的發展。結論：通過高表達內、外源性抗氧化蛋白(MsrA、EpK、PON1等)靶向性重塑HDL的抗氧化能力，可顯著調節在體循環及血管壁的氧化狀態，為As、脂肪肝等HDL異常相關的重大代謝性疾病的防治提供新的思路與策略。
