酪蛋白嗎啡

生物活性

1.1免疫活性作用

淋巴細胞轉化功能和紅細胞免疫功能。據推測，β一酪啡肽還能通過調節淋巴細胞增殖而促進胎兒免疫系統的發育。

1.2阿片活性作用

神經遞質的作用，例如，β一酪蛋白的水解生成的酪啡肽片段的胺基酸排列順序與內源性的阿片肽的N一末端排列順序相似（Modey，198l，1982）。從β一酪蛋白的水解產物中進一步純化出的六肽和四肽，在體外均具有阿片肽的活性（Brantle，1985），可以顯著抑制細胞腺苷酸環化酶活性，降低細胞內cAMP水平，除酪蛋白外，小麥谷蛋白的胃蛋白酶水解產物中也存在有阿片肽作用的肽。

1.3促進激素分泌

胰島素和胰增血糖素的分泌有促進作用。當動物預先攝食一定劑量的胺基酸和蔗糖，再攝食一定量的β一酪啡肽，激素的增加量要比直接飼餵β一酪啡肽提高7倍。這種作用很可能與調節攝食後葡萄糖利用率以及攝食行為有關。

1.4對消化活動的作用

中樞神經系統和腸肌叢中的阿片受體結合，從而影響胃腸運動。這種影響主要是延遲胃排空時間。抑制腸道轉運消化物。近年來，歐洲一些研究人員接連報導了酪蛋白受胃腸適量蛋白酶作用後可以釋放出生物活性肽，改變了長期以來，把酪蛋白看作單純營養性蛋白質的舊印象。

酶解與製備

在食物蛋白水解研究中涉及到的酶類很多，包括細菌膠原酶、胰蛋白酶、地衣形芽孢桿菌鹼性蛋白酶、嗜熱菌蛋白酶等，還有胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶、木瓜蛋白酶、放線菌酶等，另外也可套用植物蛋白酶，如無花果蛋白酶、木瓜蛋白酶、鳳梨蛋白酶等。有報導說微生物酶具有更高的選擇性，但單利用微生物酵解製取活性肽還沒見報導。

酶的選擇要求酶的專一性強，且不會隨著水解度的提高出現苦味。針對不同底物，選用不同的混合酶。通常選擇胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的混合物，因為胰蛋白酶能專一性的與賴氨酸或精氨酸殘基結合，而胰凝乳蛋白酶僅能水解酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸殘基的肽鍵。

在對酪啡肽水解製備的研究中，尤以胃蛋白酶等動物消化蛋白酶最為常見。並且每一種酶都有自己的專一切割位點。在體外對牛β一酪蛋白利用胃腸蛋白酶進行水解，可以釋放出β一酪啡肽一7。

分離純化

1、通過Bio-Gelp-2、、胺基酸分析儀、質譜分析通過峰值比較得到B一酪啡肽樣物質。

2、通過反相液相色譜十八烷醇酯矽膠柱，用線性梯度的乙睛，含有0.1%—氯乙酸在流速10ml/min進行洗脫。阿片肽片段可以通過苯乙基矽膠柱和氰基丙烷矽膠進一步純化。

3、用反相液相色譜，毛細管電泳，免疫印記的等電聚焦分離綿羊酪蛋白的方法已經得到評估。通過電子噴霧離子質譜分析和矩陣幫助雷射吸收作為一種鑑別蛋白成分的工具。

4、使用毛細管電泳一雷射誘導螢光一增強型電荷耦合器件系統，用異硫氰酸螢光素柱前衍生了亮腦啡肽、甲硫腦啡肽、血管緊張肽、P物質4種生物活性肽。