《載基因組織工程人工血管的研究》是依託南開大學，由張鈞擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：載基因組織工程人工血管的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：張鈞
- 依託單位：南開大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
組織工程血管中種子細胞的來源，尤其是心血管疾病患者的細胞來源是很大的問題，人工血管的體內組織工程是對支架材料進行活性和功能修飾，在體內獲得細胞，但在體內捕捉的細胞缺少功能化的修飾。而且，人工血管主要用於心血管和糖尿病患者，患者血液中的NO量低，超氧自由基含量高，影響細胞增殖分化及血管的重構。本項目將基因與材料支架結合，可以使基因局限於組織移植和再生的部位，而且基因/材料複合物均勻分布在支架表面，提高基因的轉染效率，我們將採用eNOS和Netrin-1基因，Netrin-1可以促進NO的產生，研究表明其還可以降低超氧自由基，我們將進一步研究這種作用機制，以期這種載基因血管在大鼠體內尤其是糖尿病大鼠模型中改善移植血管內皮化，提高血管通暢率發揮作用。
結題摘要
組織工程血管中種子細胞的來源，尤其是心血管疾病患者的細胞來源是很大的問題，人工血管的“體內組織工程”是對支架材料進行活性和功能修飾，在體內獲得細胞，但在體內捕捉的細胞缺少功能化的修飾。而且，人工血管主要用於心血管和糖尿病患者，患者血液中的NO量低，超氧自由基含量高，影響細胞增殖分化及血管的重構。 項目對PCL材料進行了一系列的生物活性修飾，其中包括融合蛋白VEGF-HGFI的修飾和基因修飾，這些修飾能夠給PCL支架材料帶來新的功能，增強材料與細胞和組織的相互作用，促進組織的再生及修復。融合蛋白VEGF-HGFI可用於對PCL支架材料的修飾，並能提高材料的細胞相容性、血液相容性和組織相容性，在人工血管的套用中也起到了顯著的積極作用。 項目還利用疏水蛋白作為基因載體套用到了組織工程支架的研究中。在生理條件下，HGFI帶有負電，PEI-DNA複合體帶有正電，因而可通過正負電荷相互作用將PEI-DNA複合體固定在修飾有HGFI蛋白層的PCL材料表面，從而達到基因修飾的目的。用到的質粒DNA可以表達綠色螢光蛋白（GFP）和內皮型一氧化氮合酶（eNOS）。GFP的表達表明了基因遞送成功，且據此可通過流式細胞儀計算轉染效率。通過DAPI對質粒進行標記，複合到PCL支架上後進行螢光成像有藍色螢光信號可證明基因通過正負電荷作用被固定在了PCL支架材料上，通過體外轉染實驗及流式細胞儀的測定可對該基因修飾材料的體外轉染效果進行評價，通過大鼠皮下埋植實驗對該基因修飾材料的體內轉染效果進行評價，結果表明載基因支架有效促進了支架材料在大鼠背部皮下的血管新生。一系列結果證明該體系能成功將基因固定在PCL支架上，並在體內體外成功完成基因遞送，表達目的蛋白並在動物體內發揮功能。
