《軟骨退變特異性關節液microRNA的篩選及功能研究》是依託西安交通大學，由姚建鋒擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：軟骨退變特異性關節液microRNA的篩選及功能研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：姚建鋒
- 依託單位：西安交通大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
膝骨關節炎（OA）的早期診斷對於改進治療改善預後具有重要意義，現有診斷標記物尚未達到臨床套用標準，microRNA在其它疾病的診斷中展現出了極大潛力。本研究擬採用深度測序技術結合生物信息學分析、分子生物學實驗篩選並驗證膝OA特異性關節液microRNA及靶基因；繼而通過前交叉韌帶切除法建立小鼠OA模型，結合臨床組織標本採用原位雜交等技術觀察候選microRNA的組織定位和變化規律；然後通過IL-1β刺激原代培養軟骨細胞建立OA細胞模型並觀察候選microRNA對軟骨細胞存活及膠原合成的影響，評價獲選microRNA的功能；最後建立候選microRNA-X基因敲除小鼠觀察其對軟骨發育、退變的影響從而進一步驗證候選microRNA功能。預期將揭示特定microRNA與軟骨發育、退變的關係，並有可能發現一種有前途的膝OA診斷標記物，對於膝OA的早期診斷具有重要意義，可以為早期診斷提供新的選擇。
結題摘要
骨關節炎是一種由於關節軟骨進行性破壞引起關節結構和功能損害的疾病，該病受遺傳、年齡、肥胖和炎症因子等各方面因素的影響。闡明骨關節炎發病的分子作用機制，防止軟骨的降解和退化，對於疾病的防治具有重要的意義。近年來，microRNA在疾病的診斷和治療領域獲得了廣泛的研究。課題組在初期收集到的與骨關節炎病人相匹配的健康對照的關節液數量太少，不足以進行後續的研究工作，因此調整研究計畫收集臨床上的血液樣本進行microRNA的篩選工作，並進行了相關的功能和分子作用機制研究。與骨關節炎相關的轉錄組研究工作，篩選出了與該病相關的microRNA進行生物信息學分析，並結合以往的研究工作，對兩個microRNA進行靶基因的驗證和信號通路傳導的研究工作；構建了骨軟骨生成的骨基質明膠大鼠模型並驗證了與軟骨發育和骨關節炎相關的microRNA；結合臨床實踐，進行大量文獻查閱，對基因的單核苷酸多態性（single nucleotide polymorphism, SNP）位點進行薈萃分析，揭示出GDF5, FRZB, DVWA是骨關節炎的易感基因，並用分子生物學方法驗證了microRNA-3690與GDF5基因直接作用。本項目的研究工作，發現了骨關節炎相關microRNA新的分子作用機制，為疾病的發病機理及疾病的預防和治療提供了重要的實驗依據。
