《複雜體系中微量PTP1B抑制劑的快速識別新方法研究》是依託中南大學，由陳曉青擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：複雜體系中微量PTP1B抑制劑的快速識別新方法研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：陳曉青
- 依託單位：中南大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B(PTP1B)在細胞傳導中起重要作用，是治療Ⅱ型糖尿病的重要靶點，因此尋找安全有效的PTP1B抑制劑是抗糖尿病藥物研究的關鍵之一。在前期實驗中，對湘西民間常用治療糖尿病藥用植物進行系統篩選，發現某些中藥如兗州卷柏和紅蓼等具有較強PTP1B抑制活性。中藥複雜體系中活性成分快速篩選是中藥研究的熱點和難點問題。本項目擬建立快速高通量識別複雜體系中PTP1B抑制劑的聯用新技術HPLC-PTP1B EAD-MS，系統研究中藥提取物中PTP1B抑制劑，並採用HSCCC導向製備單體化合物，建立一套基於HPLC-PTP1B EAD-MS/HSCCC技術的中藥複雜體系中PTP1B抑制劑的快速篩選和製備方法。套用現代光譜方法與化學方法鑑定結構，同時進行系統的體外活性篩選和構效關係分析，以期發現新型PTP1B抑制劑，為找尋和開發抗糖尿病新藥奠定基礎，同時促進化學分析分離新技術的探索與發展。
結題摘要
中草藥有效成分的研究是發現和創製新藥的一條重要途徑。但中草藥所含化學成分相當複雜，尋找其中的有效成分對於闡明中草藥的作用機理、研發天然藥物源新藥有著重要的作用。傳統中草藥活性成分的分離分析基本遵循先對中草藥成分進行分離鑑定，再進行藥理活性測試，最終獲取活性成分信息的步驟。該研究方式效率低、費時費力、且前期分離缺少目的性。因此，發展快速的篩選技術以及高效的分離技術有助於提高中草藥活性成分研究水平。作為近年來發展起來的色譜分離技術，高速逆流色譜(HSCCC)具有無不可逆吸附、回收率高、製備容量大等優點，廣泛套用於中草藥中化學成分的製備分離。然而相對於傳統的HPLC而言，其理論塔板數較低、色譜解析度較差，在分離成分複雜的天然藥物時，能力受限的一維單功能HSCCC時常遭遇挑戰，難以完成目標藥物的有效分離。色譜聯用能有效增加色譜的峰容量和解析度，是改進化合物分離度、加快分離速度的有效途徑。 針對上述問題，本項目提出了基於酶修飾磁性納米粒子快速篩選中草藥中活性成分的分析方法，將酶或蛋白共價鍵合在多種磁性納米材料表面，將此功能化納米材料與中草藥提取物混合培養，利用酶與抑制劑、蛋白與受體間的特異性結合作用，通過HPLC和MS/MS檢測技術分析，確定了具有潛在活性的化合物信息；建立了CCC-SPE-CCC、線上二維、串聯及閉路循環等多個HSCCC聯用體系，結合循環、梯度、絡合及離線二維等HSCCC操作模式，以上述篩選結果為導向，開展目標活性化合物的製備分離，並鑑定其結構；從天然活性小分子結構-活性相互關係出發，研究了多酚、黃酮結構變化對其各種生物活性的影響，闡明多酚、黃酮生物活性對應的特徵結構，在此基礎上，進一步研究多酚、黃酮與蛋白質相互作用對其抗氧化活性、乙醯膽鹼酯酶抑制活性以及抗菌活性的影響，並初步探討了糖尿病對多酚生物利用度及生物活性的影響。上述研究結果為找尋和開發天然藥物源新藥奠定了基礎，同時促進了分析分離新技術的探索與發展。依託於項目主體研究內容，項目還開展了疾病靶標的高靈敏檢測、活性先導藥物的不對稱合成及水樣中污染物的富集檢測，促進了分析化學、藥物化學等相關學科的發展。項目實施期間總計發表SCI論文41篇(均已標註資助)，授權發明專利2項，培養博士後1名、博士生6名、碩士生10名。
