《補腎法重建和維持機體穩態的基因組甲基化機制》是依託復旦大學，由黃建華擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：補腎法重建和維持機體穩態的基因組甲基化機制
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：黃建華
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
我們的研究顯示補腎藥具有撤藥後遠期療效，並發現補腎能特異調節下丘腦-垂體-腎上腺-淋巴細胞軸上相關基因的表達，補腎藥撤退後這些基因的表達水平能否維持？上述均涉及補腎中藥重建和維持機體穩態的機制。基因甲基化是國際表觀遺傳學研究前沿，甲基化使基因表達沉默或降低；去甲基化則使基因表達重新激活。兩者所致基因表達改變在撤除了外界干預也長時間維持，故基因甲基化水平能探測基因表達維持情況及機制。.本項目在衰老大鼠腎虛證模型，分別在補腎干預後、撤補腎藥1周、1月、3月，檢測大鼠認知、神經內分泌免疫等，明確撤藥後藥效維持時間；取下丘腦等組織，採用MeDIP晶片技術檢測基因組甲基化水平，篩選被補腎藥顯著調節、而在撤藥過程中甲基化水平不變的基因，並檢測其mRNA表達，以撤藥1個月以上甲基化和mRNA表達水平均維持不變的基因為補腎法重建和維持穩態的關鍵基因。本項目為首次對證的穩態重建及維持進行深入解析。
結題摘要
本項目首先在自然衰老腎虛模型觀察了補腎藥物是否具有重建穩態的作用發現補腎藥能提高血漿IGF-1、DHEA、GH的水平，對皮質酮、雄激素的血漿水平沒有顯著影響；能降低血甘油三酯。撤除補腎藥後僅升高的IGF-1仍維持，其它生化指標撤藥後恢復，反映補腎藥對IGF-1的作用具有長期效果。通過基因表達譜研究我們發現補腎藥物能顯著調節，且撤退後其表達不會恢復的基因11個，採用甲基化晶片發現其中3個發生了DNA甲基化改變，但和IGF-1長期升高之間的關係還需要研究；同時對基因表達數據的挖掘中發現隨著衰老的加劇（增齡），不同組織間基因表達譜的關聯下降，補腎藥能重建此關聯，但撤藥後大範圍的關聯重建沒有發現。自然衰老腎虛模型常混雜脾虛、血瘀等情況，因此我們決定在腎陽虛模型觀察上述作用，但傳統的糖皮質激素腎陽虛模型，激素停用後，動物下丘腦-垂體-腎上腺皮質（HPA）軸功能抑制迅速恢復，本身不能穩定，故此我們首先改進了該模型。借鑑“久病及腎”的思路，改進的方法採用長期低劑量飲水給予糖皮質激素（模擬慢性應激），結果動物出現24小時尿量增多、生殖功能降低等腎虛的典型表型，尤其動物的HPA軸功能在撤激素後仍穩定低下，並篩選到了“HPA軸功能低下穩態”備選基因（被糖皮質激素上調或下調，撤激素後表達不能恢復），該具有穩態特徵（HPA軸功能穩定低下）的腎陽虛模型為以後進行補腎藥的重建穩態作用研究奠定了基礎。通過該項研究我們獲得了一些重要發現；提出並深入闡釋了把證候看做相對穩態進行研究的價值和意義；建立了具有穩態特徵的新的腎陽虛證動物模型。
