基本介紹
- 中文名：衰變加速因子
- 外文名：decay-accelerating factor
簡介,基本介紹,
簡介
促衰變因子（decayacceleratingfactor,DAF）是Nicholson-Weller等（1981）用正丁醇提取後，再以層析法從人和豚鼠紅細胞基質中純化的一種膜蛋白。因其具有促進C3轉化酶衷變的活性故名。經在還原條件下做SDS-PAGE並以過碘酸-Schiff試劑染色表明，純化的DAF為單鏈膜糖蛋白。人和豚鼠的DAF分子量不同分別為70kDa和60kDa。現已按白細胞分化抗原將其歸為CD55。Davitz等（1986）通過用磷脂醯肌醇（PI）特異性的磷脂酶C（PI-PLC）處理人外周血細胞可釋放DAF的事實探明，DAF是經糖磷脂醯肌醇（glycosylphodphatidylinositol,GPI）錨而固定於細胞膜中的。即糖蛋白的C末端共價結合於含PI的糖磷脂上，再經PI插入細胞膜脂質雙層的外層小葉中。研究表明，膜DAF的遷移率接近於膜類脂的遷移率，比大多數膜蛋白遷移率高一個數量級。認為這有助於促進數目有限的膜DAF分子與細胞表面大量的C3b或C4b片段接觸。另外DAF的糖磷脂醯肌醇結構還可能具有轉導細胞信號的作用。
基本介紹
除Nicholson-Weller等證實的分子量為70kDa的膜DAF外，Kinoshita等（1987）用Westernblotting在人紅細胞表面還檢出分子量為140kDa的一種膜DAF，稱其為DAF-2。DAF-2在膜上的數目不足70kDa膜DAF的1/10，但也有促進C3b轉化酶衰變的活性，也含有GPI錨結構。由於DAF-2的分子量較70kDa的膜DAF大一倍，提示其為膜DAF的二聚體，但用二巰基乙醇或以SDS使基變性，都不能將DAF-2裂解成兩個成分，故DAF-2的精確結構仍有待進一步闡明。另外，近年套用兩位點RIA測定法，在血漿、尿液、淚液、唾液、滑膜液和腦脊液，以及組織培養上清中均檢出可溶性的DAF（sDAF），水平的40-400ng/ml範圍。並發現尿液中的sDAF分子量略低於紅細胞上膜DAF的分子量，疏水性也較膜DAF小，其抑制細胞表面C3轉化酶內在裝配的活性較膜DAF約低100倍，但仍具有促進已形成的C3轉化酶衰變的作用，效能類似於C4bp。
膜DAF廣泛分布於各種血細胞及其他各處的細胞上，包括紅細胞、粒細胞、單核細胞、淋巴細胞（T、B）、血小板、骨髓單個核細胞、紅細胞的始祖細胞，角膜、結合膜、消化道黏膜、外分泌腺、腎小管、膀胱、子宮黏膜、胞膜、心包及滑膜的上皮細胞，精子，以及培養的臍靜脈內皮細胞上。但NK細胞上則缺如。陣發性血紅蛋白尿（paroxysmalnocturnalhemohlobulinuria,PNH）病人的紅細胞上也缺少DAF，並以缺乏程度將該病分為三個型。PNH病人的紅細胞對補體介導的溶血作用高度敏感，就是由於紅細胞上缺乏DAF及基它含GPI錨的分子而引起的。DAF帶有Cromer抗原。極少數稱之為Inaba或IFC缺乏的Cromer相關抗原的個體也缺乏DAF。
DAF生物學活性及生理功能已虱到充分證實。它可保護宿主細胞免遭補體介導的溶解破壞。其作用機理是，DAF不僅可阻止經典或替代途徑C3和C5轉化酶的裝配，並且可通過誘導催化單位C2a或Bb的快速解離而使已形成的C4、C5轉化酶失去穩定性，從而抑制補體攻擊單位的活化（圖5-15）。DAF的這種抑制作用僅限於直接結合在細胞上的C3、C5轉化酶，也即DAF不抑制靶細胞上正常的補體激活劑如微生物和免疫複合物。但DAF不能作為I因子裂解C3b和C4b的輔因子而發揮作用。另外，DAF雖不能阻止C2和B因子（分別通過與C4b或C3b結合）與細胞的最初結合，但卻可使C2a或Bb由它們結合的部位解離出來，以而阻止C3轉化酶的裝配。
編碼人DAF的基因位於第1號染色體的長臂上32區一個800kb片段內，與其它幾種補體激活調節劑（RCA）的基因緊密連鎖，排列順序依次為：MCP-CR1-CR2-DAF-C4bp。其中DAF基因的長度約為C4bp。其中DAF基因的長度約為35kb，以限制性酶譜分析表明為一單拷貝基因。在DAF基因的非編碼區還有3個限制性酶切片段長度多態性（RFLP）結構，兩個為HindⅢ酶切位點，1個為BamhⅠ酶切位點。DAF的cDNA已克隆成功，並進行了核苷酸和胺基酸序列分析。關於DAfcDNA和膜糖蛋白的結構見圖5-16。DAF的cDNA結構從5`端開始依次為：信號肽區、四個SCR（長度1143bp）、富含絲氨酸與蘇氨酸（S/T）的區（約70個胺基酸）及疏水區，最後終止於3`端的poly（A）。由cDNA推導的胺基酸序列得出DAF蛋白由381個胺基酸所組成，包括34個胺基酸的信號肽，富含S/T的區為DAF中大多數延伸的O-連線的糖基化部位。SCR中有1上N-連線的的糖基化部位。C末端的疏水區在翻譯後被糖磷脂所取代，為DAF分子與細胞膜相結合的部位。
