《血管性血友病因子的單受體-單配體研究》是依託華中科技大學，由肖波濤擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：血管性血友病因子的單受體-單配體研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：肖波濤
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
血管性血友病因子（VWF）的異常是先天性白血病的主要原因，也能引起惡性血栓的形成，但機制不詳。我們在哈佛的合作者發現VWF A1域能與血小板上的GPIb形成一種從未觀測到的柔性鍵，與逆鎖鍵有爭議。在本項目中，我們重組出多種A1域和GPIb疾病類型的單受體-單配體分子，並改變連線肽段的長度。以這些分子在磁鑷光鑷上做單分子斷裂力預實驗，發現疾病類型的變異體使負反應速率向延伸態漂移。單受體-單配體分子的出現，也使我們能解決一個幾十年來懸而未決的課題：正反應速率與力的關係。力鉗預實驗發現拉力會降低反應體系中分子相遇的機率、並減慢鍵形成的速度。除了斷裂力和力鉗實驗，我們還將做結合力實驗。我們將研究從延伸態解離後，受體或配體的構象能否維持並加快鍵的形成。我們將建立力與正反應速率的理論模型，並把一維速率推導到三維。結果將有助於實現長期目標：提高診治血管性血友病和血小板減少性紫癜的效率，開發拮抗劑以抗血栓。
結題摘要
血管性血友病因子在血流異常時被激活，並能與血小板結合形成栓子。VWF及其配體分子的遺傳變異導致2B類型和血小板類型的血友病。受體-配體的相互作用如何受到血流剪應力等的調控，如何導致凝血異常，是有關藥物研發的關鍵問題，亟待研究。在本項目中，我們重組出多種疾病類型的VWF A1域和GPIba的單受體-單配體分子。以這些分子在光鑷和磁鑷上做單分子斷裂力實驗，發現在10 pN以上拉力作用時，疾病類型變異體的負反應速率小於野生型。我們採用0-20 pN的力程和精細的面元，發現負反應速率隨力呈現滑移-逆鎖-滑移鍵的交替變化。分析單受體-單配體分子的數據，建立了正反應速率與力的重要關係。力鉗實驗發現拉力會降低反應體系中分子相遇的機率、並減慢鍵形成的速度。以上結果揭示了VWF和GPIba的作用機理，有助於診治血管性血友病和開發抗血栓藥劑。
