《蜂蜜花源酚類標記物與酚類對DNA氧化損傷的保護機制》是依託西北大學，由曹煒擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：蜂蜜花源酚類標記物與酚類對DNA氧化損傷的保護機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：曹煒
- 依託單位：西北大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
酚類化合物是廣泛存在於蜂蜜中的一類有機化合物，具有較高的抗氧化活性。已有研究表明，酚類化合物可以作為單花種蜂蜜的花源標記物，因而引起了研究者的關注。中國擁有較多的單花種蜂蜜，但對其花源標記物、酚類化合物的結構、抗氧化活性及抗氧化機制了解較少。本研究套用有機分析的方法，表征椴樹蜜、荊條蜜及龍眼蜜中主要酚類化合物的結構；採用指紋圖譜技術確定3種單花種蜂蜜花源的酚類標記物；以活性氧誘導人體外周淋巴細胞DNA和pBR322DNA損傷為模型，評價3種蜂蜜酚類化合物對活性氧致DNA氧化損傷的保護作用，探究其保護機制，從而篩選高抗氧化活性的酚類化合物。研究結果將為蜂蜜溯源及質量控制提供依據，同時為高活性天然抗氧化劑提供新的開發資源，對蜂蜜的加工利用及深入認識蜂蜜的中藥藥理活性具有重要意義。
結題摘要
酚類化合物是廣泛存在於蜂蜜中的一類有機化合物，具有較高的抗氧化活性。已有研究表明，酚類化合物可以作為單花種蜂蜜的花源標記物，因而引起了研究者的關注。中國擁有較多的單花種蜂蜜，但對其花源標記物、酚類化合物的結構、抗氧化活性及抗氧化機制了解較少。本研究套用有機分析的方法，表征椴樹蜜、荊條蜜及龍眼蜜中主要酚類化合物的結構；採用指紋圖譜技術確定3種單花種蜂蜜花源的酚類標記物；以活性氧誘導小鼠外周淋巴細胞DNA和pBR322DNA損傷為模型，評價3種蜂蜜酚類化合物對活性氧致DNA氧化損傷的保護作用，探究其保護機制，從而篩選高抗氧化活性的酚類化合物。主要研究結果如下： 1. 建立了蜂蜜中酚類化合物的HPLC-ECD（電化學檢測）分析新方法，該方法具有選擇性強、靈敏度高等特點；在此基礎上構建了龍眼蜜、荊條蜜、椴樹蜜、棗花蜜、洋槐蜜、油菜蜜、枸杞蜜及苕子蜜等8種單花種蜂蜜的HPLC-ECD指紋圖譜，結果發現，丁香酸、p-香豆酸、阿魏酸、對羥基苯甲酸可以作為龍眼蜜的花源標記物；原兒茶酸、對羥基苯甲酸和咖啡酸可以作為荊條蜜的花源標記物；高良姜素、山柰酚和橙皮素均可以作為椴樹蜜的花源標記物； 2. 採用HPLC-ECD指紋圖譜結合化學計量學，能夠有效地鑑別單花種蜂蜜的花源；在油菜蜜中發現了一種分子量為362的特徵化合物，利用該化合物結合指紋圖譜，能夠鑑別在洋槐蜜、苕子蜜和椴樹蜜中摻入5%的油菜蜜，本研究將為蜂蜜溯源、摻假及質量控制提供依據。 3. 採用pBR322質粒DNA研究蜂蜜對氧化應激引起DNA損傷的保護機理，結果發現蕎麥蜜、棗花蜜均能有效抑制羥基自由基介導的DNA鏈的斷裂及開環。這種保護效果與酚類化合物的含量有關。蕎麥蜜在定位體系中的保護作用強於非定位體系，表明蕎麥蜜主要通過清除自由基和還原能力發揮對DNA的保護作用。通過原子力顯微鏡觀察發現，蜂蜜能夠有效修復被破壞的DNA三級結構。彗星實驗結果表明，蜂蜜中酚類化合物能夠進入淋巴細胞內部，通過絡合細胞內Fe2+或清除H2O2保護DNA。同時，動物實驗證明，蜂蜜中的酚類化合物經過代謝進入機體，提升小鼠淋巴細胞抗氧化能力。此外，我們研究發現棗花蜜能夠顯著上調HepG2肝癌細胞p53蛋白表達，上調Bax表達，活化caspase3，caspase8，caspase9信號分子，因此棗花蜜促進HepG2細胞凋亡。
