《蜂王漿主蛋白的抗衰老作用及分子機理研究》是依託浙江大學，由沈立榮擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：蜂王漿主蛋白的抗衰老作用及分子機理研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：沈立榮
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
蜂王漿是國際公認的對動物和人體具有抗衰老功能的蜂產品。新近發現王漿主蛋白MRJPs是蜜蜂幼蟲發育成蜂王的決定性因素，但關於MRJPs對人體細胞和哺乳動物的抗衰老功能尚不明確。本課題將在現有紮實研究的基礎上，作MRJPs對野生和基因突變株果蠅壽命的影響，對人胚肺成纖維細胞傳代次數、生長和衰老的影響，對衰老模型大鼠器官組織衰老的影響研究。然後檢測MRJPs對受試與對照樣本的超氧化物歧化酶活性，對丙二醛等過氧化物含量等生化指標的影響；用基因晶片檢測受試與對照樣本的基因表達譜差異，篩選出差異基因；選擇衰老高表達基因或蛋白，用實時螢光PCR和Western blot檢測受試與對照樣本的基因表達譜與蛋白質水平差異。並用實時螢光PCR測定不同樣本的端粒酶活性差異，最後作生物信息和信號通路分析。結果將揭示MRJPs對模式生物和哺乳動物的抗衰老分子機理，為在國際上率先開發MRJPs抗衰老功能食品提供科學依據
結題摘要
蜂王漿是國際公認的對動物和人體具有抗衰老功能的蜂產品。王漿酸一直被作為蜂王漿的主要生物活性成分。近年研究證實，王漿主蛋白（MRJPs）是王漿的關鍵活性成分，但對其功能缺乏系統證據。 本課題採用從蜂王漿中超濾得到MRJPs凍乾粉作果蠅和老年大鼠干預，人肺胚纖維細胞HFL-I培養，觀察MRJPs對這三種模型的抗衰老作用。果蠅試驗顯示，飼料中添加1.25%、2.50%、5.00% MRJPs使雄果蠅平均壽命分別延長4.3%、9.0%、12.4%和13.9%，使雌果蠅平均壽命分別延長5.8%、9.7%、20.0%和11.8%，MRJPs有提高果蠅攝食量和繁殖力作用，提高果蠅SOD(Cu, Zn)活力，降低脂質過氧化產物丙二醛（MDA）含量，促使SOD(Cu, Zn)、Egfr、MAPK和S6K上調。培養基中添加0.1、0.2、0.3 mg/mL MRJPs培養HFL-I細胞，顯示MRJPs具有促細胞增殖作用，延長細胞進入複製型終末時間。細胞形態、細胞群加倍數、衰老細胞染色觀察顯示，MRJPs能夠延緩細胞衰老。RT-PCR和拉曼光譜檢測顯示，MRJPs具有保護端粒，促進DNA及蛋白質在HFL-I細胞中的合成作用。對老年大鼠補充MRJP 125 mg/Kg.d和酪蛋白125 mg/Kg. d，持續14周后水迷宮法觀察顯示，補充MRJPs能改善大鼠的空間認知能力。尿液代謝組學分析結果顯示，MRJPs干預後促使大鼠呈回歸青年期趨勢。器官組織切片顯示，MRJPs可改善由衰老引起的肝臟及腎臟的病理性特徵。生化檢測結果，MRJPs能提高大鼠血液過氧化氫酶（CAT）活力，降低MDA水平，顯示抗氧化活性。RT-PCR檢測顯示，MRJPs干預能提高抗衰老相關基因foxo1基因轉錄水平，上調mTOR和 S6K 基因轉錄水平，顯著提高血液中端粒酶逆轉錄酶TERT基因的表達。結論：通過補充膳食MRJPs可以促進機體抗氧化能力的提高及消除自由基活性，細胞增殖、改善空間認知能力，衰老相關基因的下調，保護端粒酶，促進DNA及蛋白質的合成，從而產生延長壽命的效果。此課題研究從動物和細胞分子水平證明了MRJPs為蜂王漿中具有抗衰老作用的關鍵生物活性物質，為蜂王漿的質量控制和評價、標準制訂提供了重要科學依據，將促進蜂王漿深加工、王漿蛋白新產品開發和市場推廣。
