《蛋白磷酸酶1負向調控TLR信號效應及相關分子機制研究》是依託浙江大學，由張婷擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：蛋白磷酸酶1負向調控TLR信號效應及相關分子機制研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：張婷
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
Toll樣受體（TLR）是免疫細胞識別病原保守成分啟動固有免疫和適應性免疫的重要分子, 其過度活化將導致免疫病理反應, 因此TLR信號通路受到複雜而精細的調控。蛋白磷酸酶1(PP1)作為非常重要的絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶參與調節多種信號途徑。但PP1與TLR信號調節的關係尚未明確。我們前期研究發現，LPS不影響巨噬細胞（Mφ）中PP1蛋白的表達,但明顯抑制PP1的磷酸酶活性。且過表達PP1顯著降低TLR配體誘導Mφ分泌前炎性因子和I型干擾素。提示PP1負相調控TLR信號效應。本課題通過過表達和干擾技術，研究PP1表達改變後TLR配體誘導Mφ分泌細胞因子及相關信號分子的變化，並通過免疫共沉澱和去磷酸化實驗探討PP1負向調控TLR信號的作用靶分子及胺基酸位點。從而提出TLR-PP1-TLR的反饋環路。該項目的完成為進一步闡明天然免疫穩態維持和精細調控機制提供理論基礎，並為防治感染性疾病提供新靶點。
結題摘要
Toll樣受體（TLR）是免疫細胞識別病原保守成分啟動固有免疫和適應性免疫的重要分子，其過度活化將導致免疫病理反應，因此TLR信號通路收到複雜而精細的調控。蛋白磷酸酶1（PP1）作為非常重要的絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶參與調節多種信號途徑，調節細胞周期、基因表達、蛋白合成、糖脂代謝、組織分化發育以及記憶形成等生理過程。但PP1在天然免疫反應中的作用及其分子機制並不明確。我們首次發現蛋白磷酸酶1(PP1)參與負向調節巨噬細胞TLR信號通路。TLRs配體不影響PP1蛋白在小鼠巨噬細胞系RAW264.7中的表達，但明顯抑制了PP1的磷酸酶活性。同時還發現PP1抑制TLR和RLR誘導的巨噬細胞中IRF3活化。進而證明了PP1以磷酸化依賴的方式抑制TRIF-、RIG-1-、MAVS-、TBK1-、IKKε-活化的IRF3、IFN-b報告基因的表達。最後證明PP1在Ser385 和Ser396位點去磷酸化IRF3從而減弱TLR-和RLR-刺激後的巨噬細胞分泌I型干擾素。因此。PP1作為IRF3的磷酸酶成為TLR和RLR誘導的免疫反應的負反饋調節子。進一步闡明PP1在天然免疫穩態維持中發揮精細調控作用。
