蘇雲金芽孢桿菌Cry1類毒素免疫廣譜檢測技術研究

內容簡介

　　採用正負篩選方法，成功獲得6株具有Cry1Ab毒素蛋白結合活性的陽性噬菌體單域抗體菌株，利用基因工程抗體易於定向修飾及Cry毒素具有相似結構的特點，以Cry1Ab毒素單域抗體基因為材料，通過同源建模及分子對接技術分析了Cry1Ab抗體與5種Cry1類毒素的關鍵胺基酸結合位點，以關鍵結合位點及其鄰近位點為目標，利用SPDBV軟體進行虛擬協同突變，預測親和力及廣譜性都有所提高的突變抗體，並通過定點飽和突變技術定向改造母本抗體構建突變抗體庫；克隆表達了Cry1類毒素共性結構域，並利用共性結構域蛋白包被和多種Cry1類毒素交替包被篩選策略，獲取了5個檢測對象可覆蓋多種Cry1類毒素的廣譜抗體，比較分析突變抗體和母本抗體的親和力及廣譜性，探索廣譜抗體識別區的分子結構特性，為建立高靈敏度多種BtCry毒素的免疫篩查方法和開發Cry毒素高效檢測技術奠定基礎。

圖書目錄

前言

第一章緒論

一、Cry毒素的分類和命名

二、蘇雲金芽孢桿菌Cry毒素的結構與功能

三、蘇雲金芽孢桿菌製劑及其轉基因產品存在的風險

四、蘇雲金芽孢桿菌Cry毒素檢測技術

（一）生物測定法

（二）PCR擴增檢測法

（三）分子雜交技術

（四）免疫學檢測方法

五、抗體的發展

六、噬菌體抗體庫技術

七、抗體基因的體外高頻突變技術

第二章人源化抗蘇雲金芽孢桿菌Cry1Ab毒素單域抗體的篩選及活性鑑定

一、材料與方法

（一）材料與試劑

（二）方法

二、結果與分析

（一）特異性重組噬菌體單域抗體的富集

（二）單克隆ELISA方法篩選陽性重組噬菌體

（三）菌液PCR結果

（四）噬菌體單域抗體的胺基酸序列比對

三、討論

四、結論

……

第三章同源建模結合點突變技術構建單域抗體定點飽和突變庫

第四章蘇雲金芽孢桿菌（Bt）Cry1類毒素共性結構域的分析定位

第五章蘇雲金芽孢桿菌（Bt）Cry1類毒素共性結構域的原核表達、純化及鑑定

第六章 Cry1類毒素的廣譜抗體篩選、鑑定及廣譜特異性分析

參考文獻

附錄

縮寫符號說明

後記

蘇雲金芽孢桿菌Cry1類毒素免疫廣譜檢測技術研究

基本介紹

內容簡介

圖書目錄

熱門詞條