《藥物轉運蛋白OATP1B1的功能關鍵區域和翻譯後調控機制研究》是依託華南農業大學，由洪梅擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：藥物轉運蛋白OATP1B1的功能關鍵區域和翻譯後調控機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：洪梅
- 依託單位：華南農業大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
有機陰離子轉運多肽（OATP）家族的成員廣泛分布於人體各器官中，介導物質跨細胞膜的轉運，決定著多種藥物的生物利用度，是影響藥物療效的重要因素之一。我們在前期研究中，鑑定了OATP1B1跨膜區域2中四個影響其轉運功能的關鍵胺基酸；並發現在OATP1B1結構中的第二和第五個胞外環上存在糖基化位點，而糖基化修飾影響OATP1B1的蛋白穩定性，進而影響了該轉運蛋白的轉運功能。本項目在此基礎上，擬進一步鑑定與分析OATP1B1中與轉運功能密切相關的其他跨膜區域（跨膜區域6和11）內關鍵胺基酸的功能，探索重要的翻譯後調控機制寡聚化和磷酸化對OATP1B1轉運活性的影響，並進一步研究OATP1B1中與這些翻譯後調控機制相關的結構區域，從而獲取該轉運蛋白結構-功能關係更系統的信息，為深入地了解OATP1B1藥物轉運的分子和細胞學機理、更有效地評估OATP1B1轉運藥物的藥效和可能存在的副作用提供理論基礎。
結題摘要
有機陰離子轉運多肽家族成員OATP1B1特異性表達於肝細胞基底外側膜，對於通過肝臟吸收、代謝藥物的藥動學和藥效學都起著重要的作用。明確OATP1B1轉運藥物的分子機制，可為有效提高已有藥物的藥效和更好地評估其可能存在的副作用提供重要的理論依據。本研究中我們對OATP1B1跨膜區域中的關鍵胺基酸以及翻譯後修飾對OATP1B1的調控過程進行了研究，獲得的結果如下： （1）在TM1中發現了兩個顯著影響OATP1B1轉運功能的賴氨酸及在TM6中鑑定了兩個高度保守的色氨酸，與OATP1B1和底物的結合、底物的選擇性等相關；對TM11的研究則發現了7個關鍵胺基酸，它們在蛋白穩定性、膜定位以及底物結合等方面影響OATP1B1的轉運能力； （2） 研究發現蛋白激酶C（PKC）的激活會影響OATP1B1在細胞膜上的表達，從而改變其轉運底物的能力。該過程是通過PKC促進轉運蛋白的內化和外循環導致的； （3） 研究首次發現OATP1B1可形成同源二聚體及更高階的寡聚體，並發現該同源寡聚體的正確形成與模式底物硫酸雌酮的轉運相關。研究還鑑定了OATP1B1序列上與寡聚體形成相關的甘氨酸393位點，該位點為GXXXG motif的一個部分，將其突變會使參與寡聚體的蛋白間結合能力顯著下降。 項目的研究結果為進一步闡明OATP1B1轉運藥物的分子與細胞學機制提供了信息，為提高藥物生物利用度及開發以OATP作為靶點的新型藥物提供了理論依據。
