《藍靛果花色苷C-3-G抑制輻射誘導氧化損傷作用機制研究》是依託哈爾濱工業大學，由趙海田擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：藍靛果花色苷C-3-G抑制輻射誘導氧化損傷作用機制研究
- 依託單位：哈爾濱工業大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：趙海田
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
電離輻射可對機體造成多種損傷，嚴重時甚至引發染色體畸變，導致癌症等惡性疾病的發生。加強輻射防護，減輕放射病是當今亟待解決的重要課題。從天然產物活性成分中開發高效、低毒的新型防護因子已成為研究的熱點。申請人前期研究發現藍靛果花色苷對輻射誘導氧化損傷具有良好的防護作用，並經分離鑑定發現其最佳活性成分為矢車菊素-3-葡萄糖苷（C-3-G）。本項目以C-3-G為研究對象，重點圍繞輻射損傷中“氧化應激誘導細胞凋亡”這一重要損傷防護途徑，通過體內和體外模型，結合RNAi、WB和qPCR技術，明確C-3-G輻射防護的關鍵信號傳導通路、調控模式、作用靶蛋白在信號傳導通路中所處位置，從整體、組織、細胞和分子水平揭示C-3-G防護輻射誘導氧化損傷作用的機制。該研究將為花色苷類植物化學物在天然產物輻射防護劑的套用研究提供理論依據，對推動植物化學物在促進健康和功能性食品的開發研究起到積極的作用。
結題摘要
隨著核工業和放射技術的發展，電離輻射與人們的關係越來越密切。電離輻射可對機體的造血系統、免疫系統、神經系統造成多種損傷。天然產物作為無毒無害的輻射防護劑，前景廣闊。本研究以矢車菊素-3-O-葡萄糖苷為研究對象，對藍靛果花色苷複合組分進行分離純化得到C-3-G單一花色苷組分，對其進行體外清除自由基的測定，並對C-3-G的輻射防護功能及機制進行研究。（1）C-3-G的分離純化：採用聚醯胺樹脂層析和高效液相製備色譜技術分離純化藍靛果花色苷複合組分，得到C-3-G單一組分。通過高效液相分析測得製備樣品純度為95.74%。（2）C-3-G體外清除自由基活性研究。C-3-G對ABTS自由基、DPPH自由基、羥基自由基和超氧陰離子自由基清除活性均高於藍靛果花色苷複合組分。其中，C-3-G對ABTS自由基和羥自由基的清除能力高於抗壞血酸。研究表明，C-3-G是一種良好的天然抗氧化劑和自由基清除劑。（3）C-3-G對輻射誘導小鼠氧化應激損傷的防護作用研究。通過研究小鼠體重、臟器指數、外周血白細胞數、骨髓細胞微核數和肝臟組織形態學變化分析以及血清中T-SOD活力、CAT活力、GSH水平和MDA含量的測定，研究C-3-G對輻射誘導小鼠氧化損傷的防護作用。結果表明，C-3-G可有效地提高輻射小鼠的免疫器官指數，改善小鼠肝臟形態學變化，增加小鼠外周血象白細胞數降低骨髓細胞微核率。C-3-G顯著提高小鼠血清中抗氧化酶T-SOD、CAT活性，增加內源抗氧化物GSH水平，降低脂質過氧化物MDA的含量，從而抑制輻射誘導的氧化應激對細胞及組織造成的損傷。（4）C-3-G對小鼠輻射防護用機制研究。研究發現，輻射導致小鼠肝細胞核內Nrf2基因和蛋白及其下游的HO-1、GST、NQO1的基因和蛋白表達降低。與輻射組相比，C-3-G干預組小鼠總Nrf2及核內Nrf2基因和蛋白表達均顯著增加，同時，HO-1、GST、NQO1的基因和蛋白表達也顯著增加。結果表明，C-3-G上調Nrf2基因和蛋白表達，促進Nrf2的入核轉運，激活下游抗氧化蛋白及二相解毒酶HO-1、GST及NQO1的基因和蛋白表達，激活Nrf2通路，從而抑制輻射對小鼠造成的氧化應激損傷。
