《與EB病毒腫瘤發生密切相關的潛伏膜蛋白的結構與功能》是依託天津大學，由嚴漢池擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：與EB病毒腫瘤發生密切相關的潛伏膜蛋白的結構與功能
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：嚴漢池
- 依託單位：天津大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
EB病毒潛伏存在於多數國人體內，但多不致病。條件合適時，潛伏的 EB病毒可重活化，誘導細胞惡性轉化，引發淋巴癌、鼻咽癌、胃癌等多種惡性腫瘤。潛伏膜蛋白LMP1和LMP2與EB病毒潛伏態細胞的惡性轉化及腫瘤發生相關。LMP1是EB病毒癌基因，其表達產物可劫持腫瘤壞死因子受體CD40介導的信號通路，抑制細胞凋亡和細胞周期調控，誘導細胞癌化。LMP1三聚體化是其活性所需，抑制其寡聚化已成為針對LMP1的藥物研發的重要方向。LMP2與LMP1起協同作用，但不直接誘導細胞轉化；它可作為信號調節子促進病毒潛伏感染態的建立和維持，阻止EB病毒進入病毒增殖期。LMP2還是我國EB病毒腫瘤免疫治療疫苗研發的重要靶點。目前尚無LMP1和LMP2三維結構被報導。解析整合膜蛋白LMP1和LMP2的晶體結構，有利於闡明其干預細胞信號的精確分子機理，促進相關藥物和疫苗研發，亦代表結構生物學領域國際前沿水平。
結題摘要
EB病毒可誘發鼻咽癌、淋巴瘤等疾病，國人多潛伏攜帶該病毒而不發病。一旦病毒由潛伏態活化，可誘導細胞惡性增殖，形成腫瘤。期間，病毒的潛伏膜蛋白LMP1劫持腫瘤壞死因子受體CD40介導的信號通路，優勢結合於TNFR結合蛋白TRAF、RIP及致死結構域蛋白TRADD等，進而抑制正常的細胞凋亡，誘導細胞增殖和癌化。潛伏膜蛋白自聚集及其與TNFR結合蛋白的互作和結合是其活性所需，抑制其寡聚化，阻斷它與TRAF等的互作是相關疾病防治的重要方向。解析潛伏膜蛋白及與腫瘤壞死因子受體結合蛋白的複合物的結構有助於闡明分子機理，為相關藥物研發提供結構基礎。基於此，我們申請立項並開展《與EB病毒腫瘤發生密切相關的潛伏膜蛋白的結構與功能》研究。本研究中，我們克隆、表達並製備了潛伏膜蛋白及其互作結合蛋白的全長基因/部分重要功能結構域片段樣品，對它們的生化性質和功能進行了深入分析研究，並成功組裝了LMP1-TRAF3複合物，獲得多種不同結合劑量比（3：1、3:3、1:3）、不同功能性聚集狀態等多種組裝模式的複合物，這暗示其聚集、互作和結合模式與LMP1在體內疾病發生過程中的活性變化及功能調節相關。LMP1-TRAF3複合物已獲得多種可衍射的晶體，結構解析正在進行之中。此外，我們開發了一種基於活細胞內GFP螢光強度的，微量、快速、高通量的，定量檢測/篩選真核細胞表達的膜蛋白水平的原位方法，並成功獲得LMP1全長蛋白的大量表達，製備了LMP1全長膜蛋白，運用CryoEM解析其三維結構的工作正在推進中。
