《與人類脂代謝紊亂高度相似的基因工程倉鼠模型的構建》是依託北京大學，由劉國慶擔任負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：與人類脂代謝紊亂高度相似的基因工程倉鼠模型的構建
- 項目負責人：劉國慶
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
基因工程小鼠是當前用於脂代謝研究的主要模式動物，但其脂代謝與人類有很大的差異。倉鼠則與人類脂代謝高度相似，曾廣泛套用於相關研究。由於存在技術瓶頸，國內外以往沒有關於基因工程倉鼠的報導，由此限制了倉鼠的充分利用。申請人近年來成功構建了多種基因工程小鼠、家兔和小型豬脂代謝紊亂模型；並根據過去套用倉鼠進行脂代謝研究所積累的經驗，開展了構建基因工程倉鼠的探索工作。在研發出專利技術，解決了倉鼠受精卵發育阻滯這一特殊難題後，套用透明帶下顯微注射慢病毒方法，構建成功了GFP轉基因倉鼠品系。論文發表於Cell Res後，在國際上引起了強烈反響。在此突破的基礎上，本課題擬構建ApoC3和PCSK9轉基因倉鼠，以獲得高膽固醇和高甘油三酯血症兩種與人類最常見的脂代謝紊亂高度相似的基因工程倉鼠品系；並通過系統的表型分析，明確其脂代謝紊亂和動脈硬化發病特點，開創和引領一個套用基因工程倉鼠研究代謝性心血管病的新領域。
結題摘要
人類疾病動物模型是生物醫學研究中驗葛祖的重要工具，但我國在疾病動物模型研究方面仍然缺少源頭創新、具有國際先進水平的成果。雖然目前有各種基因工程小鼠用於人類疾病研究，但由於小鼠與人類多方面的差異，以基因工程小鼠建立的疾病模型與人類疾病有很大差別。因此創建擬人化的人類疾病模型就非常必要。豬與猴雖然與人類相似程度高，但是基因工程操作技術難度大，成本高昂，實驗時間冗長，限制了這些物種的廣泛套用。 我們套用與人類在脂代謝及心血管疾病方面相似的倉鼠，開展了擬人化脂代謝紊亂模型的構建研究。在解決了倉鼠受精卵體外發育的基礎上，我們CRISPR-Cas9基因組定符編輯技術，構建了多微您拳種擬人化基因工程倉鼠疾病模型，占據了疾病動物模型的一個重要制高點。這些倉鼠模型包括LDL受體敲除的“壞膽固醇”增高冠心病模型，具有與人類相似的顯性遺傳特徵（雜合子即發病），動脈硬化病變發生在冠狀動脈（北京倉鼠）；LCAT基因敲除的“好膽固醇”消失動脈硬化倉鼠模型，血漿HDL完全消失，拔腳循鑽動脈硬化病變明顯加重，與小鼠的結果相反而和人類相似（上海倉鼠）；ApoC2敲除的嚴重高甘油三酯血症模型，新生期死亡但可以通過靜脈注射血漿和AAV-ApoC2而成功救治用於急性胰腺炎和動脈硬化研究（長沙倉鼠）。根據這些擬人化倉鼠模型總結的研究論文均發表在有影響力的SCI期刊上。其它如ABCA1、ApoC3、SRA等敲除的倉鼠模型也均分別獲得了基金委面上項目的進一步資助。 基因工程倉鼠成果目前已成功轉化。我們通過京津冀精準心血管病聯盟，在石家莊建立了具有上萬個倉鼠飼養籠充舟烏位的河北伊維沃公司，專門從事基因工程倉鼠的產業化發展，於近期獲得了SPF級別倉鼠的使用和生成許可證，為阜外醫院、武漢大學、諾和諾德製藥公司、諾華製藥公司以嶺藥業集團公司等教學科研機構提供了有關基因工程倉鼠的科研和商業服務端少煮。基因工程倉鼠疾病模型的推廣套用，將彌煮朽捉牛補基因工程小鼠在脂代謝及心血管疾病研究中的不足，開創一個屬於中國的、套用基因工程倉鼠於心血管病轉化醫學研究的新時代。
