自編碼DNA聚合酶的ssDNA病毒基因組複製模式

自編碼DNA聚合酶的ssDNA病毒基因組複製模式

《自編碼DNA聚合酶的ssDNA病毒基因組複製模式》是依託江蘇大學,由姚勤擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

  • 中文名:自編碼DNA聚合酶的ssDNA病毒基因組複製模式
  • 項目類別:面上項目
  • 項目負責人:姚勤
  • 依託單位:江蘇大學
項目摘要,結題摘要,

項目摘要

家蠶細小病毒樣病毒(BmPLV)是唯一的自編碼DNA聚合酶的ssDNA病毒,也是首例動物二分體病毒。它擁有與細小病毒相似的基因組結構,即反向末端重複(ITR)的線性單鏈DNA。其區別是該病毒ITR不能形成髮夾結構,基因組自編碼DNA聚合酶。這兩項特徵否定了該病毒DNA能像細小病毒似的自我引發-滾發卡複製。申請者一直潛心於該病毒研究,獲得了它可能以蛋白起始複製的線索。本項目擬研究 ①病毒ssDNA的5'末端結構, 確定5'端是否存在共價結合的末端蛋白;②複製起始的蛋白組成及其結合的ssDNA核心元件;③ ssDNA的複製起始方式,確定起始複合物以及複製中間體的結構;④ DNA持續合成和鏈延伸模式,確定從複製起始到DNA鏈延伸的轉換型式以及聚合酶的鏈置換的能力。以BmPLV為原型,闡明自編碼DNA聚合酶的ssDNA病毒複製機制,為研究該類病毒的侵染和遺傳特性以及命名和分類奠定基礎。

結題摘要

家蠶二分濃核病毒(Bombyx mori bidensovirus, BmBDV)是首例自編碼DNA聚合酶的ssDNA病毒。2012年國際病毒分類委員會(ICTV)為該特異病毒新設立二分DNA病毒科。BmBDV是引發家蠶罹患類似昆蟲濃核症的病原,主要侵染家蠶的柱狀細胞。該病毒粒子結構以及基因組類似細小病毒,但複製方式卻不同。 ①本項目以家蠶二分濃核病毒BmBDV為原型,通過對病毒ssDNA的5'末端結構;複製起始的蛋白組成及其結合的ssDNA核心元件;ssDNA的複製起始方式; DNA持續合成和鏈延伸模式等探索研究,闡明了家蠶二分濃核病毒為代表的自編碼DNA聚合酶的ssDNA病毒是以蛋白起始的方式複製。②構建了家蠶二分濃核病毒基因組可恢複線性末端結構克隆,線性化病毒基因組在轉染家蠶細胞系中能檢測子代DNA複製並能實現病毒拯救,間接證明家蠶二分濃核病毒BmBDV基因組以蛋白起始方式複製。③分析家蠶二分濃核病毒粒子結構蛋白的組成以及表達病毒樣粒子,確定複製起始的蛋白組成。 發表了SCI論文9篇;合作撰寫《模式生物家蠶》專著1部;獲江蘇省科技進步二等獎1項、獲教育部自然科學二等獎1項;項目組負責人2016年獲選國際病毒學分類委員會委員,並成為最新組建的二分DNA病毒國際研究組成員。科研合作的加拿大國立科學研究院(INRS)Armand-Frappier研究所的國際病毒學專家彼得.泰森(Peter Tijssen)教授因對課題組人才培養貢獻卓著喜獲2016年江蘇省政府頒發的“江蘇友誼獎”。 以BmBDV為原型,闡明自編碼DNA聚合酶的ssDNA病毒複製機制,為二分濃核病毒載體研究奠定基礎,同時為也二分DNA病毒的起源和進化研究指明了方向。

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