自噬清除活化的炎性體抑制DAMPs誘導的肺損傷的實驗研究

《自噬清除活化的炎性體抑制DAMPs誘導的肺損傷的實驗研究》是依託南昌大學，由劉芬擔任項目負責人的地區科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：自噬清除活化的炎性體抑制DAMPs誘導的肺損傷的實驗研究
• 項目類別：地區科學基金項目
• 項目負責人：劉芬
• 依託單位：南昌大學

項目摘要

最新研究提示細菌感染並不是導致SIRS 的唯一致病因素，文獻報導和我們的前期研究發現，線粒體來源的DAMPs（MTDs ）是內源性DAMPs的主要來源之一，其可通過多種途徑引起炎症細胞炎性體活化和炎症因子失控性釋放，是嚴重創傷、休克時肺損傷發生的主要機制。然而，能否通過清除活化的炎性體，阻斷MTDs致炎作用尚待研究。近來研究發現炎性體的活化可誘導細胞內自噬，而自噬反饋性清除活化的炎性體並抑制其誘導的炎症反應。因此，本項目擬採用MTDs 誘導肺泡巨噬細胞炎症反應，觀察調控肺泡巨噬細胞自噬水平後，自噬對活化的炎性體的清除作用及對炎症因子的影響，探討其抑制MTDs誘導炎症反應的作用及機制；然後通過霧化吸入雷帕黴素或重組慢病毒載體pLenex-Beclin1，靶向上調大鼠肺內的自噬水平，探討其對MTDs 誘導的肺損傷的保護作用，為嚴重創傷、休克導致的肺損傷提供新的治療途徑。

結題摘要

最新研究提示細菌感染並不是導致SIRS 的唯一致病因素，文獻報導和我們的前期研究發現，線粒體來源的DAMPs（MTDs ），可通過多種途徑引起炎症細胞炎性體活化和炎症因子失控性釋放，是嚴重創傷、休克時肺損傷發生的主要機制，然而，能否通過清除活化的炎性體，阻斷MTDs在肺內的致炎作用未見報導。近來研究發現炎性體的活化可誘導細胞內自噬，而自噬反饋性清除活化的炎性體並抑制其誘導的炎症反應。因此，本項目通過體內外觀察MTDs對肺部的致炎效應， 以及調控自噬對MTDs誘導的肺損傷炎症反應的影響，探討自噬減輕MTDs誘導AM炎症反應的機制。體外實驗發現，MTDs刺激AM後，上清液中TNF-α、IL-1β和IL-18含量顯著升高，細胞中炎性體NLRP3、ASC和Pro-caspase-1蛋白表達增多；上調自噬或阻斷炎性體活化後，上清液中成熟caspase-1和IL-1β含量，以及細胞中ASC聚合體、NLRP3、ASC均顯著減少；體內實驗證實，將MTDs自大鼠氣道給予後，大鼠BALF中IL-1β、IL-18及TNF-α炎症因子、W/D值明顯升高，血管通透性增加，肺組織病理改變顯示肺泡結構破壞，中度炎症細胞浸潤，肺泡腔內少許度蛋白沉積，而上調自噬後或阻斷炎性體活化後上述炎性指標均明顯下降，肺損傷程度明顯改善，且進一步證實自噬能通過NLRP3參與減輕MTDs誘導的肺損傷。基於以上結果，我們得出結論，外源性MTDs可誘導AM炎症因子分泌和NLRP3炎性體相關蛋白表達，且上調自噬可以減輕MTDs誘導的急性肺損傷，其機制是自噬影響MTDs活化的NLRP3炎性體的穩定性，促進其降解，減少caspase-1活化，從而抑制炎性體特異性炎症因子IL-1β和IL-18成熟和分泌。本研究為嚴重創傷、休克導致的肺損傷提供新的治療途徑。