《腸道病毒71型識別並結合宿主細胞受體的分子機制研究》是依託武漢大學，由鄔開朗擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：腸道病毒71型識別並結合宿主細胞受體的分子機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：鄔開朗
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腸道病毒71型(EV71)是手足口病的主要致病因子，同時還可以引起無菌性腦膜炎、腦幹腦炎和脊髓灰質炎樣的麻痹等多種與神經系統相關的疾病, 致殘及病死率較高。目前仍沒有安全有效的疫苗來預防EV71的感染，也缺乏可套用於治療的特異、高效的抗病毒藥物。EV71能識別兩個受體PSGL-1和SCARB2，VP1是識別受體的病毒蛋白。病毒識別並結合受體是病毒感染的第一步。本項目擬採用克隆表達VP1、PSGL-1、SCARB2及其截斷突變體蛋白，通過結合實驗找到VP1與PSGL-1和SCARB2結合的部位，通過Biacore測定VP1與PSGL-1和SCARB2結合能力並比較其差異，並用晶體結構的方法研究VP1與PSGL-1和SCARB2結合的詳細信息，徹底弄清VP1與PSGL-1和SCARB2識別結合的分子機制，為研製EV71的疫苗，抗病毒藥物，了解病毒變異規律提供理論基礎。
結題摘要
腸道病毒71型(EV71)感染仍然是目前全球威脅性較大的病毒性疾病之一，尤其在東南亞其危險性更大。EV71是手足口病(hand ,foot and mouth disease , HFMD)的主要致病因子，同時EV71感染還可以引起無菌性腦膜炎、腦幹腦炎和脊髓灰質炎樣的麻痹等多種與神經系統相關的疾病, 致殘及病死率較高。EV71的VP1蛋白識別並結合宿主細胞受體，開啟病毒感染的第一步。阻止病毒與細胞受體結合是研究開發抗病毒感染藥物的重要策略，弄清病毒蛋白與細胞受體識別並結合的分子機制是研究開發抗病毒藥物的基礎。本項目的研究內容將包括四部分①VP1、PSGL-1、SCARB2的生物信息學分析②VP1和PSGL-1、SCARB2識別及結合部位的確定③VP1蛋白和PSGL-1、SCARB2蛋白結合能力的比較研究④VP1蛋白、SCARB2蛋白、VP1與PSGL-1及SCARB2形成的複合物的晶體結構研究。我們通過生物信息學分析確定了VP1、PSGL-1、SCARB2的可能結合部位：VP1（1-450aa），PSGL-1（1-420aa）、SCARB2（1-500aa），將這些基因片段克隆到表達載體進行表達，並在此基礎上進行截斷突變。VP1蛋白和PSGL-1、SCARB2蛋白結合能力的比較研究顯示VP1與PSGL1 的親和力比VP1與SCARB2的親和力要弱;VP1與SCARB2的結合部位可能在50-200aa之間。進行VP1蛋白、SCARB2蛋白、VP1與SCARB2及其突變體形成的複合物的晶體條件篩選，沒有篩到得到VP1 、SCARB2的結晶條件；但獲得了複合物的結晶條件，對其進一步最佳化其中結晶條件50ul pHbuf（5.5）50ul 100%E.G 210ulPEG 190ul H2O長出的晶體質量較好（解析度可達7埃）但是還沒有達到結構解析的要求。這些結果為理解VP1與PSGL-1和SCARB2識別結合的分子機制，為研製EV71的疫苗，抗病毒藥物，了解病毒變異規律提供理論基礎。雙鏈寡核苷酸(dsON)在體外抗EV71的效應研究以及肝細胞生長調節因子酪氨酸激酶底物（Hrs）抗EV71的作用和分子機制研究為開發抗EV71藥物開發提供了一些經驗。
