《脂聯素通過mTOR信號通路抑制骨肉瘤發生髮展的機制研究》是依託中南大學，由黎志宏擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：脂聯素通過mTOR信號通路抑制骨肉瘤發生髮展的機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：黎志宏
- 依託單位：中南大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
骨肉瘤是起源於骨骼的高度惡性腫瘤，其發病率在原發性骨惡性腫瘤中居首位。脂聯素是脂肪細胞分泌的一種脂肪因子，近年研究表明脂聯素與惡性腫瘤的發生髮展起著密切負相關作用，但其具體機制目前尚不明確。我們前期工作發現脂聯素在骨肉瘤患者血清中表達水平顯著下降，其受體在骨肉瘤組織亦有特異性表達，同時脂聯素可隨時間和濃度改變激活mTOR上游信號分子AMPK，從而抑制mTOR的表達，提示其可能通過調節骨肉瘤組織細胞中的mTOR信號途徑發揮作用,據此提出假設脂聯素通過mTOR信號通路抑制骨肉瘤的發生髮展。我們將用骨肉瘤細胞系（SaOS-2，MG-63）以及脂聯素基因敲除小鼠、成骨細胞特異性Rheb1基因敲除小鼠以及人體骨肉瘤組織活檢，從離體、在體以及人體三個層面闡明脂聯素對於骨肉瘤mTOR信號通路的作用及機制。該研究將為骨肉瘤的的發生和發展提供重要信息，為臨床骨肉瘤的治療提供新的思路和藥物新靶點。
結題摘要
骨肉瘤是起源於骨骼的高度惡性腫瘤，其發病率在原發性骨惡性腫瘤中居首位。脂聯素是脂肪細胞分泌的一種脂肪因子，近年研究表明脂聯素與惡性腫瘤的發生髮展起著密切負相關作用，但其具體機制目前尚不明確。本課題從骨肉瘤細胞系、臨床患者標本等不同水平對脂聯素通過調節骨肉瘤組織細胞中的mTOR信號途徑發揮骨肉瘤發生髮展調控作用的機制進行研究。我們發現脂聯素在骨肉瘤患者血清中表達水平顯著下降，而其受體在骨肉瘤患者組織及骨肉瘤細胞株中卻高表達；同時證實脂聯素具有抑制骨肉瘤細胞株增殖、遷移及侵襲和促進凋亡的作用，且其作用效果具有濃度依賴性及細胞株間差異性。此外，脂聯素可隨時間和濃度改變激活mTOR上游信號分子AMPK磷酸化水平和降低Akt（Ser473）磷酸化水平，從而抑制mTOR的表達，並可抑制骨肉瘤MG-63細胞中mTOR下游信號蛋白p70 S6K1（Thr389）、4EBP1（Thr47/46）的磷酸化水平，我們還通過慢病毒轉染過表達骨肉瘤細胞株中mTOR蛋白雙向證明此結論，這提示脂聯素通過調節骨肉瘤組織細胞中的mTOR信號途徑發揮作用。同時，我們還發現脂聯素可協同增強PI3K/Akt特異性抑制劑LY294002對骨肉瘤細胞株的增殖、侵襲抑制或凋亡誘導作用。此外，已先後培養了骨肉瘤、滑膜肉瘤及尤文肉瘤等多種骨與軟組織惡性腫瘤原代細胞。已完成37例臨床不同性別和不同病程骨與軟組織惡性腫瘤（包括17例骨肉瘤）患者的骨肉瘤人源性異種移植小鼠（PDX）模型操作（皮下移植和骨髓原位移植），解決了腫瘤樣本運輸處理和凍存、復甦關鍵技術難題，並經過PDX原代和傳代模型與患者組織學、基因學檢測一致性表明成功，目前骨與軟組織惡性腫瘤PDX建模成功率接近50%。成功建立鼠源性K7M2骨肉瘤細胞荷瘤正常免疫Balb/c小鼠，成瘤率達80%。該研究將為骨肉瘤的的發生和發展提供重要信息，為臨床骨肉瘤的治療提供新的思路和藥物新靶點。
