《胰脂酶mPlrp2在肝臟的條件性表達的分子機制及功能》是依託南京理工大學，由張建法擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：胰脂酶mPlrp2在肝臟的條件性表達的分子機制及功能
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：張建法
- 依託單位：南京理工大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
肝星狀細胞的激活和增生在肝纖維化過程中起主要作用。肝臟維A酯的損失易導致肝星狀細胞活化，肝纖維化是以肝臟維A酯的降解作為開始。抑制星狀細胞維A酯的水解，防止星狀細胞的激活，從而抑制纖維化的形成和發展。目前肝細胞維生素A酯的水解相關的基因仍然不清楚。本課題擬以小鼠胰脂酶mPlrp2基因在肝損傷過程中的條件性表達這一新的生物學現象作為整個項目的基本出發點，綜合運用分子遺傳學方法和技術，通過研究胰脂酶基因mPlrp2在肝臟維A酯代謝中的作用及在肝臟生理病理下條件性表達的分子機制，闡明mPlrp2的生理學功能及重要性狀的遺傳調控機理；研究環境因素及生物節律的紊亂對肝臟 mPlrp2表達和肝臟纖維化的影響，明確 mPlrp2基因在肝臟損傷過程中的表達與星狀細胞維A酯耗竭過程中的作用；並研究干預肝臟mPlrp2信號對慢性肝損傷小鼠肝纖維化的影響，為設計新的治療肝纖維化的藥物靶點提供基礎。
結題摘要
肝硬化是目前威脅人類健康的最重要疾病之一。肝纖維化是多數慢性肝病發展的共同病理過程，其發病機理不十分清楚，也缺少有效的治療方法。大量的研究表明肝星狀細胞（Hepatic stellate cell, HSC）的激活在肝纖維化形成過程中起關鍵性的作用。目前還沒有確定在生理狀態下肝臟維生素A酯水解的酶系。我們發現胰脂酶基因胰脂肪酶相關蛋白2（murine Pancreatic lipase-related protein 2，mPlrp2）可以通過在肝臟條件性表達。本研究較為系統地研究了mPlrp2在肝臟的條件性表達的分子機制，並證實了它們在肝維生素A代謝和肝纖維化進程中的作用。1.證明了 mClps、mPlrp2參與肝臟中維生素A酯的水解, 初步解決了長期困惑人們的肝臟維生素A酯如何分解和利用的生物化學問題。研究發現在維生素A缺乏小鼠肝臟中脂肪代謝基因mPlrp2和mClps啟動表達。給維生素Ａ缺乏小鼠注射甲硫腺苷能明顯抑制mPlrp2和mClps的表達，導致血液中維生素A的含量下降。分析不同組織間核苷酸含量時發現脂肪水解酶mPlrp2和mClps在維生素A缺乏小鼠肝中啟動表達與AdoMet和AdoHcy的比例有關。染色體免疫沉澱分析發現給小鼠餵以維生素A缺乏的食物能提高mPlrp2和mClps的啟動子區域組蛋白H3K4甲基化水平，從而激活肝臟中mPlrp2和mClps的表達。分析不同細胞系中mPlrp2和mClps的表達情況，發現只有在儲存維生素Ａ酯的肝星狀細胞系HSC-T6中這兩個基因啟動表達。利用siRNA干擾HSC-T6細胞中mClps的翻譯能明顯減少細胞中維生素A酯的水解。2.證實抑制肝臟脂肪代謝基因mPlrp2的表達對肝纖維化具有保護作用。發現在纖維化肝臟中mClps、mPlrp2的表達被激活。S-腺苷蛋氨酸能抑制肝中mPlrp2的表達並且能明顯降低維生素Ａ缺乏小鼠血清中的維生素Ａ含量和HSC-T6細胞系中維生素A酯的水解。RNAi抑制肝中mPlrp2的表達能明顯改善膽管結紮誘導的肝星狀細胞激活和肝纖維化。染色體免疫組化分析發現BDL小鼠肝內mPlrp2啟動子區域結合組蛋白H3K4三甲基化明顯上升。這些數據表明抑制肝臟脂肪代謝基因mPlrp2的表達對肝纖維化具有保護作用，mPlrp2有潛力成為肝纖維化的基因治療新的藥物靶點。
