《胃癌微環境MSC調節中性粒細胞極化作用及分子機制》是依託江蘇大學，由張徐擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：胃癌微環境MSC調節中性粒細胞極化作用及分子機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張徐
- 依託單位：江蘇大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
我們發現骨髓間質幹細胞(BM-MSC)及其培養上清(CM)、分泌的微囊泡(MVs)可以在體內促進胃癌生長。我們從H. pylori陽性的胃癌組織中分離獲得MSC, 並發現胃癌MSC較骨髓和癌旁組織來源的MSC更為活化，具有腫瘤相關成纖維細胞的性質。胃癌來源的MSC與胃癌發生和惡性轉化的關係值得研究。本課題以胃癌來源MSC為研究對象，以中性粒細胞為切入點，研究在慢性炎症中MSC參與調節腫瘤微環境的作用。我們採用Luminex液相晶片篩選，在體外細胞模型和體內腫瘤模型中套用分子干預技術加以驗證，確定胃癌MSC調節中性粒細胞促瘤表型極化的關鍵分子及其作用靶點。本研究將為闡明MSC在胃癌發生中的作用和分子機理提供新的證據，同時也為尋找新的胃癌治療靶點提供實驗依據，具有重要的科學意義。
結題摘要
項目研究背景： 本項目主要探討胃癌微環境中的間質幹細胞（GC-MSCs）對中性粒細胞極化的調節作用、機制及生物學意義，為揭示MSCs通過調控中性粒細胞促進胃癌的作用提供理論基礎和實驗依據。 項目研究內容： 採用GC-MSCs條件培養基處理中性粒細胞，MTT和流式細胞術檢測中性粒細胞存活和凋亡情況；實時螢光定量PCR檢測中性粒細胞IL-8、OSM、CCL2和TNF-α基因表達情況；檢測中性粒細胞對胃癌細胞遷移能力和內皮細胞管形成能力的影響。Western blot檢測中性粒細胞STAT3和ERK信號通路活化情況。採用小分子抑制劑阻斷STAT3或ERK信號通路活化，檢測對中性粒細胞凋亡、活化和功能的影響。採用Luminex液相晶片篩選GC-MSCs調節中性粒細胞的關鍵因子，並用實時螢光定量PCR和ELISA進行驗證。採用特異性抗體進行阻斷，檢測對GC-MSCs活化中性粒細胞的影響。採用活化的中性粒細胞上清作用於正常MSCs，western blot和免疫螢光檢測其CAFs相關標誌物表達，並評價作用後的MSCs對胃癌細胞遷移能力的影響。 項目關鍵數據： GC-MSCs條件培養基促進中性粒細胞存活，並抑制其自發性凋亡，上調其IL-8、CCL2和TNFα等炎症因子基因表達。GC-MSCs條件培養基活化的中性粒細胞顯著促進胃癌細胞遷移和內皮細胞管形成。GC-MSCs條件培養基主要通過激活中性粒細胞STAT3-ERK1/2信號通路而活化中性粒細胞。阻斷STAT3-ERK1/2信號通路顯著抑制GC-MSCs條件培養基對中性粒細胞凋亡保護、炎症因子基因表達誘導和促胃癌細胞遷移和內皮細胞管形成作用。Luminex分析揭示GC-MSCs分泌高水平的IL-6。拮抗IL-6/IL-6R作用明顯抑制GC-MSCs對中性粒細胞的功能活化。GC-MSCs活化的中性粒細胞上清能誘導正常MSCs向CAFs分化並促進胃癌細胞遷移。 項目科學意義： GC-MSCs通過IL-6-STAT3信號通路調節中性粒細胞表型改變和功能活化，且活化的中性粒細胞誘導正常MSCs向CAFs分化。GC-MSCs與中性粒細胞的雙向調節作用共同促進胃癌進展。本研究揭示了MSCs在胃癌微環境中的新作用，為全面認識MSCs與胃癌發生髮展提供了新證據，同時也為胃癌的干預治療提供了潛在靶點。
