《聚蘋果酸納米接枝複合物高效腫瘤靶向釋藥體系的構建》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由吳紅擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：聚蘋果酸納米接枝複合物高效腫瘤靶向釋藥體系的構建
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：吳紅
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
本課題旨在構建一種兼有配體(LHRH)主動靶向、穿膜肽(TAT)、核定位信號肽(NLS)介導高效入胞、入核特性的藥物運載體系。將LHRH、TAT、NLS依次設計在pH回響型電荷翻轉納米複合物體系中，利用正常組織與腫瘤組織pH值差異，實現載體在靶位特異性累積和將藥物高效轉運至腫瘤細胞核的多重功能。以聚蘋果酸為原料，設計2組PEG化梳狀接枝物：一組連線LHRH、β-羧基醯胺化陽離子基團及藥物DOX(或CPT)；另一組連線TAT、NLS和藥物。利用正負電荷靜電作用，自組裝成納米複合物。核磁、質譜等表征接枝物結構，芘螢光探針法研究聚合物在水溶液中的自組裝行為；光物理法研究聚合物配比、表面電荷與pH值回響之間的關係；雷射共聚焦螢光顯微法、在體成像系統檢測納米複合物與（耐藥）腫瘤細胞的相互作用、體內分布及抗腫瘤效果。體內外藥效學研究納米粒對腫瘤pH值的特異回響性及釋藥規律，驗證其逐級核靶向釋藥特性。
結題摘要
本課題構建了一種兼有配體主動靶向、穿膜肽（TAT）介導高效入胞特性的藥物運載體系。將配體和TAT設計在pH回響型電荷翻轉納米複合物體系中，利用正常組織與腫瘤組織 pH值差異，實現載體在靶位特異性累積和將藥物高效轉運至腫瘤細胞的多重功能。核磁、紅外等表征接枝物結構，芘螢光探針法研究聚合物在水溶液中的自組裝行為；光物理法研究聚合物配比、表面電荷與pH值回響之間的關係；雷射共聚焦螢光顯微法、在體成像系統檢測納米複合物與（耐藥）腫瘤細胞的相互作用、體內分布及抗腫瘤效果。體內外藥效學研究納米粒對腫瘤pH值的特異回響性及釋藥規律，驗證其逐級核靶向釋藥特性。在完成項目標書設計內容的基礎上，申請者構建了多種聚蘋果酸納米藥物載體，填補了國內聚蘋果酸作為藥物載體及相關生物學套用的空白。 1. 將多種功能基團同時接枝於PMLA骨架上，製備抗體介導和具有pH敏感電荷翻轉效應的多重功能納米接枝物，載體表面正電性促進入胞的作用優於抗體介導，兩種方式同時修飾具有更好的靶向遞送和高效入胞作用。2. 以聚蘋果酸為載體，通過自組裝和靜電吸附，製備了具有雙重pH敏感特性的電荷翻轉型納米複合物。該納米複合物同時對腫瘤胞外及胞內溶酶體/內涵體酸性環境敏感，實現兩種作用：①納米載體感應腫瘤細胞外酸性環境產生電荷翻轉，釋放帶正電荷和TAT修飾的聚合物膠束，高效入胞；②胞內溶酶體酸性環境促使藥物在胞內快速釋放。3. 製備了具有pH回響特性的TAT保護/去保護的PMLA納米接枝物。考察了穿膜肽發揮穿膜作用的最小用量（0.3%，mol/mol）及PEG發揮保護作用的最佳用量3.6%（mol/mol），並以聚蘋果酸苄基酯（PMLABz）為載體，研究嵌段聚合物膠束（PMLABz-PEG2000-TAT和PMLABz-Hz-PEG3400）對TAT的保護/去保護作用。4. 採用接枝、嵌段兩種方式得到不同結構的兩親性共聚物，研究PEG連線在鏈端或接枝在骨架自組裝得到兩種不同類型膠束的穩定性，證實平頭膠束穩定性略優於星型膠束。控制化療藥物CPT的接枝率可調節聚合物的親水/疏水性能，得到較好穩定性的聚合物膠束。
