《羅格列酮通過RANKL/RANK/OPG系統抑制關節破壞的機制研究》是依託中山大學，由戴冽擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：羅格列酮通過RANKL/RANK/OPG系統抑制關節破壞的機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：戴冽
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
噻唑烷二酮類藥物（TZDs）是過氧化物酶體增殖活化受體（PPAR）γ的人工合成配體，新近發現其在類風濕關節炎（RA）中有抗炎作用，可抑制膠原誘導性關節炎（CIA）。若能證實TZDs可抑制關節破壞則可作為改善病情藥用於RA治療。本項目擬採用TZDs羅格列酮（RSG）干預CIA大鼠，明確RSG能否延緩或阻斷關節破壞。再分別用RSG和/或PPARγ拮抗劑干預CIA大鼠及體外培養的PPARγ質粒轉染的RA滑膜成纖維細胞，觀察RANKL/RANK/OPG系統及破骨細胞的變化，明確RSG抑制關節破壞是否通過RANKL/RANK/OPG系統及PPARγ依賴途徑。旨在闡明PPARγ人工配體能否抑制RA關節破壞及其作用機制，並為今後臨床RA治療尋找一種新的安全有效的治本藥物。
結題摘要
類風濕關節炎（RA）是一種關節破壞致殘性疾病，但目前RA骨破壞的機制尚未明確。研究發現RA關節破壞的嚴重程度取決於破骨細胞 (Oc) 的數量及功能，RANKL/RANK/OPG信號通路是調控Oc的主要機制，然而RA關節部位Oc形成及活化機制尚不明確。過氧化物酶體增殖活化受體 (PPAR) γ是一種配體依賴性核轉錄因子，在炎症和免疫反應中起重要作用，其人工配體如羅格列酮（RSG）已廣泛用於治療糖尿病。研究發現PPARγ在RA中具有抗炎作用，RSG可通過抑制RANKL介導的Oc形成從而抑制牙周炎大鼠模型牙槽骨骨破壞。然而，PPARγ能否抑制RA關節骨破壞及其作用機制尚未明確。 本研究首先通過Real-time PCR及Western blot檢測發現RA滑膜成纖維細胞（FLS）較骨關節炎FLS顯著高表達RANKLmRNA和蛋白，而低表達OPGmRNA和蛋白。再將RA-FLS與健康人外周血單核細胞（MNC，Oc前體）共培養，結果7d可見TRAP染色陽性細胞，14d時成熟的Oc明顯增多，21d Oc可在骨片上形成骨吸收陷窩，提示RA-FLS可能通過高表達RANKL誘導Oc的分化及活化。進一步予不同濃度（5、10、15、20μM）RSG干預RA-FLS與健康人外周血MNC共培養體系，發現15μM RSG可抑制RA-FLS誘導Oc分化及活化，並可抑制共培養體系RANKL及MAPKs信號分子p-ERK蛋白表達，而上調OPG表達，對p-P38、p-JNK蛋白表達無顯著影響；不同濃度（5、10、15、20μM）RSG干預RA-FLS則對RA-FLS增殖無抑制作用，但可呈劑量依賴性抑制RA-FLS表達RANKL mRNA和蛋白，同時上調OPG mRNA和蛋白表達，且15、20μM RSG可明顯抑制p-ERK蛋白表達，但對p-P38、p-JNK蛋白表達無顯著影響，提示RSG可能通過抑制RANKL表達、上調OPG表達及抑制p-ERK活化從而阻斷RA-FLS誘導的Oc分化及活化。 上述結果顯示RSG通過抑制RA滑膜RANKL/RANK/OPG信號通路從而抑制 RA破骨細胞分化及活化，提示PPARγ激活參與調控RA關節部位Oc形成及活化，這不僅為RA關節骨破壞機制的研究提出新的方向，而且為今後臨床RA治療尋找一種新的安全有效的抑制關節破壞的“治本”藥提供了新的靶點。
