《維甲酸上調肺癌細胞中miRNA let7a表達的調控機制研究》是依託山東大學，由張鵬舉擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：維甲酸上調肺癌細胞中miRNA let7a表達的調控機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張鵬舉
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
MicroRNA在腫瘤中起重要作用。研究報導miRNA let7a2下調見於肺癌並且預後較差，但其在肺癌細胞中的調控機制尚未報導。我們在研究let7a2轉錄調控時首次發現維甲酸可上調let7a2在肺癌細胞中表達，本課題擬進一步探討維甲酸調控let7a2表達的機制及其作用機理，（1）克隆let7a2啟動子，構建其報導基因載體,通過報導基因檢測、啟動子活性分析、綜合突變分析、EMSA、CHIP、實時PCR等，探討維甲酸上調let7a2表達的機制。（2）構建let7a2表達載體，轉染肺癌細胞，或維甲酸處理細胞，基因晶片比較檢測let7a2或維甲酸對肺癌細胞系基因表達譜的影響，採用實時PCR、Western Blot等，檢測維甲酸上調let7a2對相關基因的表達影響。（3）收集臨床肺癌標本，檢測維甲酸受體、let7a2及相關基因的表達。為進一步研究維甲酸上調let7a2在肺癌中的作用奠定基礎
結題摘要
MicroRNA在腫瘤的發生髮展中發揮重要作用。研究報導miRNA let7a2下調見於肺癌並且預後較差，但其在肺癌細胞中的調控機制尚未報導。我們在研究miRNA let7a2轉錄調控時首次發現維甲酸可上調miRNA let7a2在肺癌細胞中的表達，本課題套用報告基因檢測、綜合突變分析、EMSA、CHIP、實時PCR等研究手段對維甲酸上調miRNA let7a2表達的機制進行了進一步的深入研究，並對維甲酸上調miRNA let7a2表達的作用及臨床意義進行了初步探討。首次發現：（1）維甲酸可以在啟動子水平上調miRNA let7a2表達；（2）維甲酸對miRNA let7a2啟動子的激活作用不是通過維甲酸受體直接作用於miRNA let7a2基因上游的4個維甲酸受體反應元件，而是通過促進NF-kappaB與miRNA let7a2啟動子中的NF-kappaB結合元件的結合，從而間接的促進let7a2基因的表達；（3）維甲酸上調miRNA let7a2表達後能夠明顯降低miRNA let7a2靶基因PRR23A和ZBP1的表達；（4）上調miRNA let7a2表達可以明顯抑制肺癌細胞增殖，促進肺癌細胞凋亡；（5）通過肺癌臨床標本分析，發現miRNA let7a2和RAR兩者的表達相關性為28%，和PRR23A表達相關性為33.3%。本項目基本按照原計畫進行，該項目由於課題組全體人員通力合作以及課題經費的及時到位，整個實施過程比較順利，目前已發表SCI收錄論文3篇，投稿1篇。總之，本研究的實施與完成，不僅豐富了我們對miRNA自身表達調控機制及其在肺癌中作用機理的了解，而且為進一步尋找肺癌臨床診治的分子靶標奠定了基礎。
