《維生素E對羅非魚抗氧化功能的microRNA調控機制研究》是依託華南農業大學，由付京花擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：維生素E對羅非魚抗氧化功能的microRNA調控機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：付京花
- 依託單位：華南農業大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
目前國內外關於營養因子影響魚類抗氧化相關基因表達的研究尚十分薄弱，而維生素抗氧化功能的microRNA（miRNA）分子調控機制則未見報導。.為深入探討營養因子保護魚類免受氧化損傷的分子機理，本項目選擇廣泛養殖且具有重要經濟效益的羅非魚為材料，通過HPLC、實時螢光定量PCR以及Western blotting等技術手段，從維生素E對脂類代謝、蛋白質代謝和核酸代謝的影響3個方面，對α-tocopherol（αT）、膽固醇、HO-1蛋白、抗氧化相關的5種蛋白mRNA及8種miRNA進行綜合分析，探討維生素E對羅非魚抗氧化相關miRNA的影響，揭示維生素影響抗氧化相關基因表達的關鍵調控因素。本研究首次從功能基因組水平探討維生素E對魚類的保護機制，揭示營養因子抗氧化功能的分子機理，同時為完善人工飼料配方及提高養殖品質提供參考。因此本項目不僅具有重要學術意義，而且具有潛在的套用前景。
結題摘要
為深入探討營養因子保護魚類免受氧化損傷的分子機理，本項目選擇廣泛養殖且具有重要經濟效益的羅非魚為材料，通過HPLC、實時螢光定量PCR以及Western blotting等技術手段，從維生素E對脂類代謝、蛋白質代謝和核酸代謝的影響3個方面，對α-tocopherol（αT）、膽固醇、HO-1蛋白、抗氧化相關的5種蛋白mRNA及8種miRNA進行綜合分析，探討維生素E對羅非魚抗氧化相關miRNA的影響，揭示維生素影響抗氧化相關基因表達的關鍵調控因素。結果顯示：飼料中維生素E過量添加（2500mg/kg ）組的羅非魚WGR、SGR均低於其它各組。羅非魚肝胰臟維生素E的含量隨飼料中的維生素E的增加呈指數式增長。總膽固醇的含量隨著維生素E添加成下降趨勢。HO-1隨維生素E的添加顯著降低，但在維生素E過量添加時與對照組無顯著差異。當維生素E過量時，基本上所有檢測的抗氧化相關蛋白質的mRNA表達量均下調；而當維生素E不足（0mg/kg）時，只有5a-R1的mRNA表達量急劇上升，而CD36，HO-1和α-TTP的mRNA表達量則呈下降趨勢。在維生素E過量時，與對照相比8種miRNA的表達量均顯著上調，而當維生素E缺乏時，部分miRNA的表達量出現不同程度的下調，例如miR-223，miR-146a，miR-16及miR-122；而其他4種miRNA則基本維持在與對照相同的程度。為確定8種miRNA與機體的抗氧化系統的關聯和提供更多關於miRNA在機體體內工作機制的信息，從美國國立生物技術信息中心（NCBI）網站上下載了尼羅羅非魚120, 991條mRNA序列和表達序列標籤來分析miRNA的靶基因：8種miRNA均有多個靶基因，從10個靶基因（miR-146a）到302個靶基因（miR-21）。另外，在本項目經費的支持下，在保證完成任務書規定任務的同時，充分利用已經獲得的實驗材料，對不同濃度維生素E處理條件下羅非魚肝臟miRNA的表達譜進行了大規模測序及比對分析，結果表明，不同維生素E濃度條件下，有特異性的miRNA出現，而且數量較大。本研究從功能基因組水平揭示維生素E影響抗氧化相關基因表達的分子調控機理，為完善人工飼料配方及提高養殖品質提供參考。同時為治療人類癌症、神經失調等疾病和老化的發生提供理論基礎，完成了研究內容，達到了預定的研究目標。
