結直腸癌新的hTERT基因啟動子結合蛋白的垂釣及功能研究

《結直腸癌新的hTERT基因啟動子結合蛋白的垂釣及功能研究》是依託浙江大學，由何超擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：結直腸癌新的hTERT基因啟動子結合蛋白的垂釣及功能研究
• 依託單位：浙江大學
• 項目負責人：何超
• 項目類別：面上項目

項目摘要

端粒酶逆轉錄酶（hTERT）是端粒酶催化亞單位，在端粒酶活性發揮中起關鍵作用。hTERT啟動子能選擇性地驅動hTERT基因在腫瘤中高表達。而人們對結直腸癌中hTERT調控的分子機制，了解尚不夠全面深入。前期研究中運用我們設計的新型啟動子垂釣鑑定系統成功垂釣出COX-2啟動子結合蛋白p300及hTERT啟動子結合蛋白AP-2β，而AP-2β能與hTERT啟動子特異性結合，促進其表達。在此基礎上，我們將：（1）在結直腸癌中運用該垂釣鑑定系統進一步垂釣、鑑定新的hTERT啟動子結合蛋白；（2）通過報告基因研究這些新的hTERT啟動子結合蛋白對hTERT啟動子活性的影響，（3）通過提高或敲低hTERT啟動子結合蛋白的表達後探討它們對結直腸癌細胞生物學功能的影響。通過本課題，以期進一步闡明結直腸癌中hTERT調控的分子機制，發現部分新的hTERT結合蛋白，並為以端粒酶為基礎的分子靶向藥物研究提供新的靶點。

結題摘要

人端粒酶逆轉錄酶（human telomerase reverse transcriptase，hTERT）是端粒酶的催化亞單位，是端粒酶的限速酶，在端粒酶活性發揮中起關鍵作用。hTERT表達升高被認為是腫瘤發生和進展的標誌性指標。腫瘤基因hTERT啟動子能選擇性地促進hTERT基因在腫瘤細胞而非正常細胞中表達。但是人們對於腫瘤細胞是如何激活hTERT的轉錄表達及提高hTERT的活性知之甚少。通過本項目研究，我們垂釣到一批結直腸癌新的hTERT基因啟動子候選結合蛋白，並已鑑定了SUPT5H是結直腸癌中端粒酶啟動子區域的特異結合蛋白。在腫瘤細胞中SUPT5H的表達明顯地激活了hTERT啟動子驅動的GFP的表達。抑制SUPT5H的表達可以降低hTERT啟動子驅動的GFP的表達和端粒酶的活性，縮短端粒長度及促進細胞衰老。我們的研究結果證實：SUPT5H是結直腸癌中端粒酶啟動子區域的特異結合蛋白，SUPT5H有可能作為一個新的腫瘤標誌物，並用於腫瘤治療的新型靶點。