節律基因Clock對小鼠凝血纖溶作用的調控機制研究

《節律基因Clock對小鼠凝血纖溶作用的調控機制研究》是依託四川大學，由成姝婷擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：節律基因Clock對小鼠凝血纖溶作用的調控機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：成姝婷
• 依託單位：四川大學

項目摘要

時間生物學的發展為血栓形成的調控機制研究打開了新的思路，推動了對凝血和纖溶系統調節因素的研究。國內外研究均證明在血栓形成中具有重要作用的凝血相關因子與近日節律和節律基因有著密不可分的聯繫。本實驗室也在前期實驗發現節律基因Clock的表達下調能夠降低小鼠血栓的形成，並找到了Clock基因調控凝血纖溶系統的潛在靶蛋白。本項目就是研究節律基因Clock對小鼠凝血纖溶系統的作用方式，並且尋找其調控血栓形成發展的信號通路，既能率先研究節律鐘基因Clock在凝血纖溶系統中的調控通路，同時又從新的角度和途徑對調控血栓形成的機製作出新的研究和詮釋，也為該病理過程的防治提供實驗依據。

結題摘要

本項目在對候選蛋白進行研究後，最終只鎖定了一個候選蛋白Alpha-1-antitrypsin。通過研究我們發現Clock基因對Alpha-1-antitrypsin的調控是通過非常規NF-KB信號通路完成的，Alpha-1-antitrypsin會隨著Clock的敲降而升高，其下游因子NE（中性粒細胞彈性蛋白酶）的表達則會降低，但仍具有節律性；而Alpha-1-antitrypsin的上調還可以通過抑制Active Protein C來抑制PAI-1的表達；之後的血漿生物標記物篩選及細胞水平驗證實驗還發現，Clock基因的下調還可以引起Fibronectin（Fn1）表達的升高，這可以導致對血小板聚集抑制的增加。這提示Clock敲降引發的纖溶增強，可能是通過對血小板聚集的影響、對非常規NF-KB信號通路調節對炎症反應的影響、以及Alpha-1-antitrypsin對Active Protein C的抑制來抑制PAI-1的表達等方面來實現的。在對血漿生物標記物篩選結果進行功能聚類分析後發現，除了凝血、纖溶、補體等相關的生物進程和信號通路的富集外，還存在明顯的抗感染免疫、和毒素運輸的富集；而對小鼠全血的血培養也證實，Clock基因敲降小鼠的全血比對照組小鼠的全血會更早的長出更多的菌落；提示Clock基因敲降後引起的小鼠纖溶增強可能與細菌感染增加有關。但這部分猜想還有待實驗的進行進一步驗證。