基本結構
移液器在臨床實驗室中因為基本結構簡單,使用方便等原因而得到廣泛套用。其基本結構主要有顯示窗、容量調節部件、活塞、0-形環、吸引管和吸頭(吸液嘴)等幾個部分。
工作原理
臨床常用的微量移液器的設計依據是
胡克定律:即在一定限度內彈簧伸展的長力與彈力成正比,也就是移液器內的液體體積與移液器內的彈簧彈力成正比。
微量移液器加樣的物理學原理有兩種:使用空氣墊加樣和使用無空氣墊的活塞正移動(positivedisplacement)加樣。這兩種不同原理的微量移液器有其不同的特定套用範圍。
常見分類
根據工作原理可分為空氣置換移液器與正向置換移液器;
根據能夠同時安裝吸頭的數量可將其分為單通道移液器和多通道移液器;
根據刻度是否可調節可將其分為固定移液器和可調節式移液器;
根據調節刻度方式可將其分為手動式移液器和電動式移液器;
根據特殊用途可將其分為全消毒移液器、大容量移液器、瓶口移液器、連續注射移液器等。
臨床套用
臨床診斷實驗室,生物技術實驗室, 藥學和化學實驗室,環境實驗室,食品實驗室
使用方法
1.選擇合適的移液器
移取標準溶液(如水、緩衝液、稀釋的鹽溶液和酸鹼溶液)時多使用空氣置換移液器,移取具有高揮發性、高黏稠度以及密度大於2.0g/cm的液體或者在臨床
聚合酶鏈反應(PCR)測定中的加樣時使用正向置換移液器。如移取15ul的液體,最好選擇最大量程為20ul的移液器,選擇50ul及其以上量程的移液器都不夠準確。
2.設定移液體積
調節移液器的移液體積控制旋鈕進行移液量的設定。調節移液量時,應視體積大小而旋轉刻度至超過設定體積的刻度,再回調至設定體積,以保證移取的最佳精確度。
3.裝配吸頭
使用單通道移液器時,將可調式移液器的嘴錐對準吸頭管口,輕輕用力垂直下壓使之裝緊。使用多通道移液器時,將移液器的第一排對準第一個管嘴,傾斜插入,前後稍微搖動擰緊。
4.移液
保證移液器、吸頭和待移取液體處於同一溫度;然後用待移取吸液體潤洗吸頭1-2次,尤其是黏稠的液體或密度與水不同的液體。移取液體時,將吸頭尖端垂直浸入液面以下2-3mm深度(嚴禁將吸頭全部插入溶液中),緩慢均勻地鬆開操作桿,待吸頭吸入溶液後靜置2-3秒,並斜貼在容器壁上淌走吸頭外壁多餘的液體。
5. 移液器的放置
使用移液器完畢後,用大拇指按住吸頭推桿向下壓,安全退出吸頭後將其容量調到標識的最大值,然後將移液器懸掛在專用的移液器架上;長期不用時應置於專用盒內。
移取方法
前進移液法
按下移液操作桿至第一停點位置,然後緩慢鬆開按鈕回原點;接著將移液操作桿按至第一停點位置排出液體,稍停片刻繼續將移液操作桿按至二停點位置排出殘餘液體,最後緩慢鬆開移液操作桿。
反向移液法
先按下按鈕至第二停點位置,慢慢鬆開移液操作桿回原點,排出液體時將移液操作桿按至第一停點位置排出設定好體積的液體,繼續保持按住移液操作桿位於第一停點位置取下有殘留液體的吸頭而棄之。
注意事項
在調節移液器的過程中,轉動旋鈕不可太快,也不能超出其最大或最小量程,否則易導致量不準確,並且易卡住內部機械裝置而損壞移液器。
在裝配吸頭的過程中,用移液器反覆強烈撞擊吸頭反而會擰不緊,長期如此操作,會導致移液器中零件鬆散,嚴重時會導致調節刻度的旋鈕卡住。
當移液器吸頭裡有液體時,切勿將移液器水平放置或倒置,以免液體倒流而腐蝕活塞彈簧。
對移液器進行高溫消毒時,應首先查閱所使用的移液器是否適合高溫消毒後在進行處理。
維護保養
移液器應根據使用頻率進行定期維護,但至少每隔3個月維護一次,檢查移液器是否有灰塵和污物,尤其注意其嘴錐部位。長期維護時需要清潔移液器內部,必須由經培訓合格的人員拆卸。
1.移液器的清潔
內部的清潔需要先拆卸移液器下半部分,拆卸下來的部件用肥皂水、洗潔精或60%異丙醇來擦洗,再用雙蒸水沖洗,晾乾,再在活塞表面用棉簽塗上一層薄薄的起潤滑作用的矽樹脂;密封圈一般無需清洗。
2.移液器的消毒
可採用常規高溫高壓滅菌處理或紫外線照射滅菌進行消毒。
3.移液器上污染核酸的去除
將移液器下半部分拆卸下來的內、外套筒,在95℃清洗液中浸泡30分鐘,再用雙蒸水將套筒沖洗乾淨,60℃下烘乾或完全晾乾,最後在活塞表面塗上潤滑劑(矽樹脂)並將部件組裝。
選擇標準
耐用性/
維護:移液器使用壽命長,僅需要很少的維護或維護成本低
符合人體工程學原理: 手感舒適,吸排液操作力輕,避免重複性肌勞損,退吸頭力小
選擇具有廠商資質售後服務的品牌。
常見移液器
微量移液器
微量移液器是生物\化學實驗室常用的小容量移取液體的單道微量移液器。
外置活塞移液器
由於蒸汽壓,密度,黏度不同,在吸取一些高黏度的物質時,如油脂,蛋白等,無法吸取。外置活塞移液器卻能勝任。
具有與單道空氣活塞式移液器一樣準確的精度和誤差係數。
可以適用於高黏度液體,如蛋白,樹脂,最高黏度可達50,000mm2/s,最高密度可達13.6g/cm3 ,如汞等;高蒸汽壓的液體,最高蒸汽壓可達500mbar,無論酒精還是一些碳氫化合物,都能輕鬆移取。發泡性液體的移取也毫無問題。
瓶口移液器
根據型號不同,通常用於中等流量(0.5ml-100ml)的液體的運輸,如酸,鹼等,根據吸取的液體的性質不同分為Dispensette III, Dispensette Organic 和Dispensette HF 。可以整體於121℃中消毒。
手動連續移液器
可以迅速而方便地完成連續移液工作,可以輕鬆完成2ul-5000ul的試劑。一次吸液完成49次之多。對於粘稠,高密度液體和高蒸汽壓液體同樣可以準確移取。適用 於Plastibrand PD吸頭,Combitips吸頭以及其他活塞式吸頭。
電子連續移液器
利用微處理器控制操作可達到自動識別特定的PD-吸頭
移液體積控制範圍從1ul-50ml,移動7.01ul,70.1ul等將毫無問題。
自動分配,電子連續移液器可根據連續三次移液的平均間隔時間,然後進行分液。(所需時間可自動計算,不需人工計算和輸入)。
智慧型充電,可直接將電子連續移液器插入充電器進行充電,也可將電池取下進行充電。更換備用電池時,原儲存數據不會因短電而丟失。
電子滴定器
常用於食品,製藥,石油化工等行業。
體積小,電池壽命長,適合於狹小空間和遠離電源的地方使用。操作簡便,吸入試劑時,按“Fill”鍵,手輪向上旋動,如開始滴定,按“Titr”鍵開始,手輪向下旋動,即開始顯示滴定體積。數字顯示,減少了人為讀數和計算體積時所帶來的誤差。無需工具,用戶可自行校準。
移液器校準
清潔後的移液器需要校準。移液器校準時必須在室溫條件(25+/-2℃)下進行。參照移液器的使用說明,不同刻度10000\5000\1000\200ul必須分別進行校準。
將移液頭裡的氣泡排除,選擇好需要校準的刻度。
將一空容器放在精度為0.1 毫克的電子天平上去皮。
按加液鍵,將水加入空容器中稱重,記錄讀數。
按照國標,移液器的校準採用“三點測試(最大量程的100%,50%和10%),每點六次”的規則,而供應商通常會選擇兩種規則:一是簡易校準,也就是兩點測試(最大量程的100%和10%),每點四次;二是嚴格校準,也就是三點測試(最大量程的100%,50%和10%),每點十次。使用者根據自己的實際需求選擇一種規則完成測試後即進入計算環節。(根據平均值與實際值間的絕對差值進行調節,用工具來擰彈簧卡扣的鬆緊)
檢修常識
常見問題 | 原因 | 解決方法 |
移液器滲漏 | ●使用了不合適的吸頭 | ●用原廠的吸頭 |
●吸頭安裝不正確 | ●穩妥安裝吸頭 |
●吸頭圓錐磨損貨污染 | ●清洗安全圓錐 ●更換安全圓錐 |
●活塞密封磨損或潤滑劑不足 | ●清洗並給墊圈重上潤滑劑 ●更換墊圈 |
●儀器損壞 | ●送去維修 |
移液性能規格超出給定範圍 | ●使用了不合適的吸頭 | ●用原廠的吸頭測試 |
●非標準測試條件或校準改變 | ●根據ISO 8655標準進行測試,必要時再校正 |
●移液器沒有定期保養 | ●進行常規維護並在測試 |
●安全圓錐過濾器污染 | ●更換安全圓錐過濾器 |
●移液器滲漏 | ●見一下說明 |
操作按鈕卡住或無法固定 | ●液體已經通過吸頭圓錐並在移液器內部變乾 | ●清洗活塞/密封處和吸頭圓錐並上油 |
●安全圓錐過濾器污染 | ●更換安全圓錐過濾器 |
●潤滑劑不足 | ●相應上潤滑劑 |
移液器阻塞,洗液容量太小 | ●液體已經通過吸頭圓錐並在移液器內部變乾 | ●清洗並給墊圈和活塞重上潤滑劑,清洗安全圓錐 |
吸頭彈出器卡住或無法固定 | ●吸頭圓錐和/或止推環污染 | ●用軟布和柔和的清潔劑或70%乙醇擦乾淨 |