福爾根反應

DNA經弱酸（1mol/L HCl）水解後，嘌呤鹼與脫氧核糖間的糖苷鍵被打開，並且使脫氧核糖與磷酸間的磷酯鍵斷開，在脫氧核糖的一端形成游離的醛基。醛基在原位與Schiff（無色品紅亞硫酸溶液）試劑結合，形成紫紅色化合物，使細胞內含有DNA的部位呈紫紅色陽性反應。紫紅色的產生是因為反應產物的分子內有醌基（醌基是一個具有顏色的發色團），所以凡含有DNA的部位，就呈紫紅色。而RNA用此法處理後則分解。

Unna染色法

1899年Pappenheim 首創了甲基綠-哌洛寧（mehtyl-green-pyronim）染色法。1902年Unna對這一方法進行了改良。 1940年Brachet研究證明用甲基綠—哌洛寧對DNA和RNA有選擇性的染色效果。鹼性的甲基綠-哌洛寧

混合染料處理細胞後，由於DNA、RNA對染料具有的親和力不同，而使這兩種染料對兩類核酸具有了選擇性。 DNA被甲基綠染成綠色，RNA被哌洛寧染成紅色，這樣就能使細胞中兩種核酸分布顯示出來。

實驗例子

材料

洋蔥根尖，洋蔥鱗莖表皮細胞

試劑

1）Carnoy固定液：無水乙醇：冰醋酸 = 3：1

2）95% 乙醇

3）70% 乙醇： 95% 乙醇 70mL 加水 25 mL

4) 5% 三氯乙酸(TCA)：固體TCA 5g，加水溶解到100 mL。

5) 1N HCl (當量鹽酸)

6) Schiff 試劑：煮沸200mL 水，稍冷放入1g 鹼性品紅，充分攪拌有助溶解，50℃時過濾，置磨口棕色瓶內，向濾液中加1N HCl 20mL ，待25℃時加亞硫酸氫鈉或亞硫酸鉀 1g ，蓋嚴放暗處，靜止勿動，幾天后，紅色稍退，溶液呈無色或淡黃色，即可使用，如有紅色，可加一勺活性炭，振盪過濾，黑布罩好。

7) Unna 染色液（甲基綠-哌洛寧G）

溶液A: 5% 哌洛寧G 水溶液 17.5 mL

2% 甲基綠水溶液 10 mL

蒸餾水 250 mL

溶液 B：0.2mol/L 的pH為4.8的醋酸鹽緩衝液。配法：先將1.2mL 醋酸液用水稀釋到100mL，再將2.7g的醋酸鈉用水稀釋到100mL，然後將醋酸和醋酸鈉兩液按77mL和100mL的比例混合。

在套用前，把A液和B液按等量混合，混合液可以保存一周時間，時間長效果不佳。

福爾根反應

基本介紹