《神經幹細胞自我更新及分化相關的細胞表面糖蛋白研究》是依託湖南師範大學，由曹銳擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：神經幹細胞自我更新及分化相關的細胞表面糖蛋白研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：曹銳
- 依託單位：湖南師範大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
細胞表面糖基化蛋白在神經幹細胞自我更新及分化等重要生理過程中具有重要作用。本研究擬以國際公認的神經幹細胞系C17.2-NCS為體外研究模型，利用生物質譜技術結合穩定同位素標記定量、O18/16標記定量及非標定量技術對處於自我更新與定向分化為星形膠質細胞狀態的細胞表面糖蛋白進行鑑定和定量比較。篩選出一批與神經幹細胞自我更新和分化相關的細胞表面受體及蛋白。在此基礎上，運用western blot，RT-PCR，免疫細胞化學，RNAi技術對候選的細胞表面糖蛋白進行進一步的驗證和功能研究。期望獲得一些與神經幹細胞自我更新及分化相關的細胞表面受體和蛋白,研究2-3種與神經幹細胞自我更新及分化相關的重要細胞表面蛋白，進一步揭示神經幹細胞自我更新及分化的分子機制，為神經幹細胞定向分化奠定基礎。
結題摘要
本課題利用目前日益完善的蛋白質標記和生物質譜技術，以本實驗長期開展研究的神經幹細胞為研究對象，對處於自我更新與定向分化為星形膠質細胞狀態的細胞表面糖蛋白進行了全面的定性鑑定和定量比較。鑑定出了一批與神經幹細胞自我更新和定向分化（星形膠質細胞）相關的細胞表面受體和糖蛋白。本課題總體進展順利，完成了既定研究任務，主要在以下方面取得了進展： （1）建立了神經幹細胞系C17.2-NSC增殖和AICAR誘導其向星形膠質細胞方向分化 (astroglial Differentiation）的研究模型。（2）比較最佳化了細胞表面蛋白掃描技術(CSC-technology)和凝集素親和富集技術，並套用凝集素親和富集技術對SILAC標誌的不同狀態的神經幹細胞（自我更新與分化為星形膠質細胞狀態）的細胞表面N-型糖蛋白進行了鑑定和定量，並確定了198個糖蛋白的糖基化修飾位點。（3）對差異的蛋白質進行了生物信息學分析，預測和驗證了幾個重要的參與神經幹細胞定向分化的蛋白質信號通路。 通過本課題研究在Journal of Proteome Research、Methods in Molecular Biology，中國生物化學與分子生物學報等雜誌發表SCI 論文1篇，專著 中的一章，應邀在20132年全國蛋白質組學會議（重慶）上做專題報告；畢業碩士研究生2名。
