《神經及相關功能性神經肽對牙周組織再生過程的影響》是依託山東大學，由李紓擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：神經及相關功能性神經肽對牙周組織再生過程的影響
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李紓
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
再生組織的神經支配與重建是再生醫學領域的研究熱點和新動向。病變牙周組織再生困難且再生組織質量存在問題，神經及相關功能性神經肽在此過程中的作用有待闡明。本項目組發現，離斷大鼠下牙槽神經後，實驗性牙周炎組織破壞嚴重，而神經生長因子可以促進牙周組織再生。我們提出神經及相關因子與牙周組織的精確再生密切相關，降鈣素基因相關肽是牙周組織再生的重要調節因子之一。本項目擬在前期工作基礎上重點解決：①神經肽（CGRP）對牙周膜細胞增殖與成骨方向分化的影響②離斷下牙槽神經後對牙周組織中神經肽特別是對骨再生具有重要作用的CGRP分泌及牙周組織再生過程的影響③外源性CGRP對牙周組織再生潛能的激發作用。從分子、細胞及組織多層面探討神經與牙周組織再生能力的關係。項目的意義在於揭示神經因素對促進牙周組織再生並提高再生組織的質量方面的作用，為深入研究基於神經因素的牙周組織再生性治療的新策略及靶點分子提供理論依據。
結題摘要
牙槽骨是全身骨組織中代謝最活躍的骨質，神經血管在牙槽骨改建過程中的作用不容忽視，其主要是通過肽能神經分泌的神經肽對骨組織起作用的。降鈣素基因相關肽( calcitonin gene related peptide, CGRP)是骨組織中分布最為廣泛的一種神經肽, 主要分布於骨代謝活躍的部位, CGRP直接或間接地通過調節成骨細胞和破骨細胞的分化及活性來影響骨折癒合。 本項目在體外實驗中，常規條件下全骨髓法培養Wistar大鼠BMSC，採用 Realtime-PCR 及 Western Blot 方法檢測了細胞的CGRP 受體CRLR 和 Ramp1，CCK-8法檢測了不同濃度CGRP促進細胞增殖的作用，並檢測出適宜濃度CGRP蛋白可促進rBMSC的成骨分化；進而採用CGRP基因慢病毒轉染rBMSC/rBMSC的CGRP基因沉默後檢測出CGRP有促進細胞增殖及成骨分化的作用，其作用機制可能是通過調節OPG/RANKL的比例來促進成骨。體內實驗選用Wistar大鼠作為受試對象，建立離斷下牙槽神經和牙周缺損雙模型，採用Realtime-PCR、Western Blot、免疫組織化學染色方法檢測大鼠牙周組織中CGRP、SP及骨改建相關因子OPG、RANKL的表達變化，失神經1w、2w後CGRP、SP、OPG的表達降低，隨後開始上升至正常水平，RANKL的表達與OPG相反，失神經後下頜骨密度降低，骨小梁稀疏，HE、Masson染色觀察到大鼠失神經後延緩了牙周組織缺損的癒合；後續實驗分別將轉染CGRP基因的rBMSC複合膠原膜及CGRP基因沉默的rBMSC複合膠原膜植入牙周缺損區，發現CGRP明顯促進失神經後的大鼠牙周組織缺損的癒合。 本課題組研究結果表明CGRP在缺損牙周組織癒合過程中有重要作用，在牙周組織再生研究領域中具有重要的理論意義。與其它組織的再生不同，缺損牙周組織再生的難點在於其持續存在的炎症微環境，拓展實驗研究表明炎性微環境影響幹細胞神經肽的分泌及成骨分化能力；在牙周炎伴牙周骨缺損的大鼠實驗中發現炎性環境可加劇缺損早期的炎症反應，增加破骨細胞的分化，從而影響牙周骨缺損的修復。如何實現抗炎和促再生的有效結合，如何在促進成骨細胞分化的同時抑制破骨細胞分化，是我們進一步需要研究的問題，以期達到更理想的牙周再生效果。
