《磷脂酶D在腸癌中的激活及促進腸癌增殖轉移的機制》是依託廈門大學，由胡天惠擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：磷脂酶D在腸癌中的激活及促進腸癌增殖轉移的機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：胡天惠
- 依託單位：廈門大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
新近研究發現磷脂酶D(PLD)在腸癌中高表達並促進腸癌發展與浸潤轉移，但其機制尚不明確。本項目首先檢測不同腸癌細胞中PLD的表達、定位和活性情況，並通過上調或下調Wnt和EGFR信號通路相關分子（Ras、Erk、PKC、Dishevelled、beta-Catenin等）檢測PLD的表達和活力變化，明確PLD的激活機制；然後過表達或敲除PLD，檢測腸癌細胞增殖遷移的變化，並觀察PLD下游分子（HIF和MMP等）的變化情況，探索PLD對腸癌細胞增殖轉移的調控機制。接下來通過裸鼠成瘤及轉移實驗探索PLD在體內對成瘤和轉移的影響。最後擬採集100例臨床腸癌樣本，檢測PLD在不同階段腸癌組織中的表達和活力，並提取術後半年未復發及半年內復發的切片樣本50例比較PLD的表達和活力情況，推斷PLD對腸癌預後的影響。本課題將系統的研究PLD在腸癌中的調控機制並為研發與PLD相關的抗癌藥物提供重要理論依據。
結題摘要
作為機體內調控磷脂代謝的重要酶類，磷脂酶D是一個在參與腫瘤發生髮展的多條信號通路上處於中心地位的分子。它既能控制細胞的生長和分化；又在多種腫瘤中表達和活性增高並促進腫瘤的增生和浸潤。目前PLD在腸癌中高表達的發現，提示其在腸癌發生髮展中起重要作用。研究和闡明PLD在腸癌中的調控和作用機制都具有非常重要的意義。 該項研究首先通過細胞增殖及劃痕實驗證明了過表達磷脂酶D（PLD）能夠促進結腸癌細胞的增殖和遷移。為了研究PLD介導腸癌發生髮展的具體機制，我們研究了多種結腸癌細胞中異常活化的EGFR和Wnt信號通路的變化。研究結果表明：EGFR通路與PLD的表達與激活沒有直接的聯繫；PKC可以顯著提高PLD活性卻不影響其表達；裸鼠體內成瘤實驗和體外細胞實驗數據同時證明在腸癌細胞中，PLD與Wnt通路之間互相調控，共同影響腸癌的生長浸潤和轉移：Wnt通路的激活可有效提高PLD的表達與活力，PLD的過表達也可以促進Wnt通路轉錄活性的升高以及下游蛋白的表達，Wnt通路重要蛋白分子β-catenin的核轉位增多；PLD活性的抑制又直接降低Wnt通路的轉錄。最後，在篩選PLD的天然抑制劑的過程中，我們發現傳統中藥單體黃連素能夠通過調節Wnt通路活性抑制結腸癌細胞PLD的表達和活力，從而調控腸癌細胞的發生髮展，是潛在的天然PLD抑制劑，具體調控機制還有待深入研究。 總之，本項目採用磷脂酶D活性測定、蛋白印跡法、螢光雙報告基因、基因晶片、動物實驗等多種技術闡明了PLD介導腸癌發生髮展的分子機制。項目揭示了在腸癌中Wnt和EGFR信號通路對PLD的調控機制，並且發現了能夠抑制PLD表達和活力的天然藥物黃連素。以上研究結果為明確PLD在腸癌發生髮展中的作用機制以及開發以PLD為靶點的抗腫瘤藥物提供了理論基礎。
