《磁性微球-聚醚類藥物抗體複合物製備及性質研究》是依託中國農業大學，由李建成擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：磁性微球-聚醚類藥物抗體複合物製備及性質研究
- 依託單位：中國農業大學
- 項目負責人：李建成
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
採用雙細乳液聚合法，製備出形貌規則、磁回響性好、表面含有羧基功能基團的磁性高分子微球。對聚醚類藥物分子進行結構改造，製備半抗原，與OVA或BSA連線後，形成完全抗原，免疫動物，製備單克隆抗體。製備有機矽摻雜菲咯啉聯釕，無機矽包覆相結合的雙結構螢光二氧化矽納米微球。利用磁性納米微球的表面羧基與抗體表面的氨基反應，使磁性納米微球與抗體相連製備免疫磁性納米微球；利用螢光微球表面的活性功能集團（羧基），採用活潑酯方法將獸藥單克隆抗體偶聯在微球表面，製備免疫螢光微球。對獲得的免疫磁性納米微球和免疫螢光微球進行分離純化並對其性質進行研究，以磁性微球作為分離載體、螢光微球作為探針，建立檢測生物樣本中藥物殘留的螢光免疫檢測方法，並對實際樣本進行檢測。.本研究的意義在於將新型磁性納米顆粒和螢光微球引入獸藥殘留研究領域，為探索獸藥殘留檢測新技術奠定理論基礎。
結題摘要
免疫磁性微球作為標記物，可以顯著縮短樣品前處理時間、大大減少或不使用有機溶劑、而且不需要高速離心等複雜設備，從而極大提高樣品檢測速度和方法的靈敏度。按照計畫書要求，我們首先製備了馬杜黴素、莫能菌素、鹽黴素和拉沙洛菌素的單克隆抗體，並對所製備的抗體進行分離鑑定，發現所製備的效價較高、範圍在40000～320000之間，且相互之間沒有交叉反應，適合於製備免疫磁珠。其次，通過對藥物單克隆抗體與磁性微球偶聯劑的選擇、摸索偶聯條件，通過對製備條件的最佳化，成功製備了馬杜黴素免疫磁珠、莫能菌素免疫磁珠、鹽黴素免疫磁珠和拉沙洛菌素免疫磁珠，抗體與磁珠的偶聯量在14.88mg/g～39.20mg/g之間，所製備的免疫磁珠均勻度、分散性、磁回響性和穩定性良好,可以重複使用3～5次。最後分別建立了馬杜黴素、莫能菌素、鹽黴素和拉沙洛菌素在雞組織中殘留的免疫磁珠淨化-酶聯免疫檢測方法，對四種藥物在不同基質的檢測限在2 μg/kg～15 μg/kg之間、IC50在1.78 ng/mL～30.07 ng/mL之間，線性範圍在0.16～45.60 ng/mL，回收率在78.1～113.0%之間，變異係數小於14.6%，完全滿足獸藥殘留檢測的要求。通過該研究，為獸藥殘留的環境友好、綠色檢測提供了技術支持和新的樣品前處理方法。
