《硫化氫對腹膜透析腹膜纖維化的干預作用及其機制研究》是依託蘇州大學，由盧穎擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：硫化氫對腹膜透析腹膜纖維化的干預作用及其機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：盧穎
- 依託單位：蘇州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腹膜透析是尿毒症患者腎臟替代治療方法之一。腹膜纖維化是腹膜透析最常見的併發症，也是引起患者退出腹膜透析治療的最主要原因，其發病機制尚未完全闡明，也缺乏有效的治療藥物。近年發現多種組織器官纖維化與H2S缺乏有關，而H2S是否參與腹膜纖維化，以及給予外源性H2S能否改善腹膜纖維化尚不明確。我們的預實驗結果證實，外源性H2S可減輕腹膜透析液引起的腹膜水腫和炎症反應。在此工作基礎上，本研究首先建立慢性腎衰大鼠腹膜透析模型，觀察外源性H2S對慢性透析大鼠腹膜結構和功能的影響；接著，運用RT-PCR、Western Blot、免疫螢光、小RNA干擾和轉基因等技術，研究H2S對高糖腹透液誘導腹膜間皮細胞損傷的影響；最後，從MAPKs、TGF-β1/Smads、CD40-CD40L信號通路的角度，探討H2S抗纖維化的分子機制。本研究有望闡明H2S多靶點抗腹膜纖維化效應，為臨床防治腹膜纖維化提供新的思路。
結題摘要
背景：腹膜透析是終末期腎臟病主要腎臟替代治療方法之一。然而長期使用非生物相容性的腹透液、反覆發生的腹膜炎等因素可引起的腹膜纖維化，並最終導致超濾衰竭，是腹透患者退出腹透治療的主要原因之一。目前，針對腹膜纖維化尚缺乏有效的治療手段。內源性硫化氫（H2S）存在於多種哺乳動物的組織和器官，大量研究表明，多種組織器官纖維化過程中伴有內源性H2S缺乏。最近研究表明，補充適量外源性H2S能夠改善心室重塑、肺纖維化、腎間質纖維化和肝硬化。因此，我們推測在腹透液中添加適量H2S可改善腹膜透析大鼠的腹膜纖維化。 主要內容，結果及數據：（1）本項目研究發現腹膜透析大鼠的腹膜明顯增厚，腹膜間皮下炎症細胞浸潤及新生血管形成顯著增加，且間皮下α-SMA、TGF-β1表達及膠原纖維沉積顯著增加，伴有腹膜通透性的顯著升高及透析超濾量的顯著減少。在腹膜透析液中添加適量H2S可顯著減少腹膜透析大鼠腹膜間皮下炎症細胞浸潤、新生血管形成及膠原成分沉積，改善腹膜轉運功能。（2）體外研究表明，腹膜透析液作用於大鼠腹膜間皮細胞，使其上皮細胞標誌蛋白E-cadherin、ZO-1及Cytokeratin的表達顯著減少，肌成纖維細胞標誌蛋白-SMA的表達顯著增加，提示細胞發生了轉分化。我們的研究首次證實了，在腹膜透析液中添加適量H2S，可顯著抑制腹膜間皮細胞轉分化，其機制是抑制腹膜間皮細胞分泌炎症因子和抑制Smad2/3磷酸化，進而阻斷TGF-β1/Smads信號通路。（3）我們的研究發現，在細胞培養液中添加適量H2S，可顯著抑制高糖腹透液誘導的腹膜間皮細胞內活性氧（ROS）增加和脂質氧化產物MDA增加，並且能夠顯著提高細胞內過氧化物歧化酶SOD活性，抑制細胞內caspase-3激活，顯著減輕高糖腹透液對細胞的氧化應激損傷、減少細胞凋亡。以上H2S抗氧化應激損傷的機制與抑制MAPKs信號通路有關。 科學意義：本項目首次在國際上證實，外源性H2S能夠顯著減輕腹膜透析液對腹膜結構的損傷，抑制腹膜纖維化，改善腹膜轉運功能，並在分子水平探明其機制與抑制MAPKs信號通路發揮抗氧化作用，及通過抑制炎症反應和抑制Smad2/3磷酸化進而阻斷TGF-β1/Smads信號通路，抑制腹膜間皮細胞轉分化有關，為H2S用於防治腹膜纖維化提供了理論依據。
