《登革病毒prM蛋白ADE表位的發現及其缺陷型疫苗株的構建》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由秦成峰擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：登革病毒prM蛋白ADE表位的發現及其缺陷型疫苗株的構建
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：秦成峰
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
抗體依賴性感染增強作用（ADE）在登革病毒的致病機制中發揮重要作用，是制約登革熱疫苗研發的主要瓶頸。最近的研究表明，prM蛋白參與未成熟登革病毒顆粒的加工過程，是影響ADE效應的重要因素。本研究從登革病毒prM蛋白的B細胞表位入手，通過計算機預測、多肽合成、表面展示等方法進行精細表位作圖，在體內外模型中分析其誘導抗體的生物學效應，發現和鑑定prM蛋白中特異的ADE表位；進一步根據計算機預測結果對上述ADE表位進行模擬改構，並利用反向遺傳學技術將一系列突變引入登革病毒減毒株的感染性全長cDNA克隆，從而構建ADE表位缺陷型重組登革病毒減毒株；經免疫螢光、蝕斑、一步生長曲線等鑑定後，結合體內外ADE分析證實表位改造對重組病毒ADE活性的影響；最後在動物模型中評價上述重組病毒的免疫效果與ADE風險。本研究的開展將能夠發現登革病毒prM蛋白特異的ADE表位，為登革熱四價疫苗的理性設計提供新的思路。
結題摘要
本項目的研究計畫包括從登革病毒prM蛋白的B細胞表位入手，通過計算機預測、多肽合成、表面展示等方法進行精細表位作圖，在體內外模型中分析其誘導抗體的生物學效應，發現和鑑定prM蛋白中特異的ADE表位；進一步根據計算機預測結果對上述ADE表位進行模擬改構，並利用反向遺傳學技術將一系列突變引入登革病毒減毒株的感染性全長cDNA克隆，從而構建ADE表位缺陷型重組登革病毒減毒株；經免疫螢光、蝕斑、一步生長曲線等鑑定後，結合體內外ADE分析證實表位改造對重組病毒ADE活性的影響；最後在動物模型中評價上述重組病毒的免疫效果與ADE風險。本項目按計畫開展了研究工作，基本完成預定的研究目標，取得了以下重要的研究結果：1、證實了登革prM抗體具有感染增強作用，同時採用多手段精細作圖，鑑定了多個prM蛋白中特異的ADE表位，並分析了這些ADE表位的結構與功能，為下一步合理設計ADE表位缺陷型疫苗株提供了重要的理論依據。2、利用反向遺傳學技術，特異地對相應ADE表位進行定點突變，成功構建了一系列ADE表位缺陷型重組登革病毒株，體內外實驗證實誘導產生的抗體在體外具有良好的中和活性，而不產生ADE活性，上述結果為相應疫苗進入臨床研究階段奠定了重要基礎。 在本項目的資助下，先後在病毒學主流雜誌J Virol等發表SCI論文18篇，在2014年廣州登革熱大流行期間出版了《登革熱防治手冊》，《登革熱的臨床與基礎研究》獲得廣州科技進步一等獎，參與制定了《登革熱的診斷標準》。在項目實施過程中，項目負責人的科研能力得到了充分的鍛鍊，研究水平也得到了很大提高，2014年獲得總後科技新星，2015年獲得國家自然科學基金優青項目資助，2016年晉升研究員，並獲得英國醫學科學院和自然科學基金委的“牛頓高級學者”資助。目前兼任《BMC Infectious Diseases》，《Scientific Reports》、《npj Vaccines》等國際期刊編委。
