《登革熱患者尿液標本中診斷標誌物的發現研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由趙慧擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：登革熱患者尿液標本中診斷標誌物的發現研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：趙慧
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
登革病毒感染可引起登革熱和嚴重的登革出血熱。目前登革熱的實驗室診斷主要依賴血液標本，檢測病毒核酸、抗原和特異抗體等診斷標誌物的水平。最近，我們發現登革熱患者尿液標本中存在病毒基因組RNA，具有潛在的臨床診斷價值。在此基礎上，本研究將與廣州醫學院附屬市八人民醫院聯合建立我國初次感染和二次感染，以及登革熱和重症登革熱患者佇列。連續採集患者發熱後不同時間的尿液標本，利用實時RT-PCR、ELISA和免疫層析法，分析尿液中病毒RNA載量、NS1抗原和IgG/IgM抗體水平，明確其動力學特徵，確定檢測視窗期。結合尿液標本的常規和生化檢查，建立完整的尿液標本資料庫，採用多重logistic回歸分析等統計學方法，揭示尿液標本中與重症登革熱相關的風險因素。該課題的完成將能闡明不同患者尿液標本中潛在的登革診斷標誌物的動力學分布，及其在登革熱臨床診斷中的價值，為登革熱的床旁診斷提供一種無創、快速的檢測手段。
結題摘要
登革病毒感染可引起登革熱和嚴重的登革出血熱。目前登革熱的實驗室診斷主要依賴血液標本，檢測病毒核酸、抗原和特異抗體等診斷標誌物的水平。本項目旨在發現患者尿液標本中潛在的登革診斷標誌物，確定其在臨床診斷中的價值，為登革熱的床旁診斷提供一種無創、快速的檢測手段。我們首先採用real-time RT-PCR法對57例登革熱患者（登革熱患者42例，重症患者15例）的158份尿液標本和73份血漿標本進行登革病毒特異的核酸片段的檢測。發現尿液中登革病毒核酸的檢測視窗期較血清延遲，但持續時間較長，表明尿液中核酸的存在可作為恢復期登革熱患者的重要診斷指標之一。同時，我們採用登革IgA快速檢測試劑盒對78名登革熱患者（登革熱患者53例，重症患者25例）的262份尿液標本進行了登革病毒特異性IgA抗體的檢測。我們發現在登革熱患者尿液中可檢測到登革病毒特異性IgA抗體。在普通登革熱患者尿液中，IgA抗體可持續存在於發病的第2-13天，而在重症登革熱患者尿液中於發病14天仍能檢測到IgA抗體。此外，二次感染患者的尿液標本中，IgA的檢測陽性率顯著高於初次感染患者。重要的是，在發病4-7天，重症患者尿液中IgA抗體的檢出率顯著高於普通患者，而且，在恢復期，重症患者尿液中IgA抗體的信號強度顯著強於普通患者。以上結果表明，尿液中存在的IgA抗體可能是重症登革熱的危險因子，IgA的檢測對於指導登革熱的臨床治療具有重要意義。此外，對2014年登革熱大流行的病原學進行了研究，我們將分離獲得的12株2014年登革1型病毒流行株進行系統進化分析，發現這些分離株分屬於基因I型和V型，與2013年的廣州流行株高度同源，提示我們登革病毒在我國已經形成了地方性流行，對登革熱的流行病學監測和媒介控制應該得到更進一步的重視。同時，對2014年登革熱患者資料進行了回顧性分析，確定了我國成人重症登革熱的預警因子包括血小板、白蛋白下降，以及乳酸脫氫酶升高。這為我國重症登革熱的早期預警及綜合防治提供了重要依據，對於完善WHO登革熱診療指南亦具有重要意義。
