《癌症生物標誌物糖基化及影響抗體親和的質譜研究》是依託山東大學，由遲連利擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：癌症生物標誌物糖基化及影響抗體親和的質譜研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：遲連利
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
本課題以一種癌症生物標誌物-人絨毛膜促性腺激素（hCG）及其抗體為研究對象，藉助先進的質譜技術為主要手段，主要開展以下幾個方面的系列研究：（一）建立和完善分析hCG糖基化細微結構的方法，用以鑑定比較不同來源的hCG糖蛋白和監控hCG的人工脫糖基反應。（二）通過比較10-20種抗體與天然hCG和脫糖基hCG親和力的差異，篩選出受糖基化程度影響最大的抗體。（三）對篩選出的抗體在hCG上的具體識別位點用質譜進行確認，從而理解糖基化影響抗體親和力的機制。.本課題的研究結果將為體外免疫方法早期診斷癌症提供結構方面的理論支持,為改進目前市場上的癌症診斷試劑產品指明方向。同時通過篩選可以識別癌症標誌素糖基化異常的抗體，為開發新一代的癌症診斷試劑進行前期準備工作。
結題摘要
糖基化是最常見和最重要的蛋白質翻譯後修飾之一，與腫瘤等重大疾病的發生髮展密切相關。人絨毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin，簡稱 hCG）一種生殖細胞癌症的生物標誌物。近年來的研究發現，癌症病人除了hCG的含量會發生變化外，hCG本身的糖基化也會發生異常變化，糖鏈變長、分支增多、結構更加複雜，即所謂的“過糖基化”現象。本項目以hCG及其抗體為研究對象，藉助先進的質譜技術為主要手段，主要開展以下幾個方面的系列研究：（1）建立和完善分析hCG糖基化細微結構的方法，用以鑑定比較不同來源的hCG糖蛋白和監控hCG的人工脫糖基反應。（2）通過比較10-20種抗體與天然hCG和脫糖基hCG親和力的差異，篩選出受糖基化程度影響最大的抗體。（3）對篩選出的抗體在hCG上的具體識別位點用質譜進行確認，從而理解糖基化影響抗體親和力的機制。 目前本項目已經順利完成，建立和完善了一套蛋白質糖基化分析的技術體系，能夠分析糖蛋白的糖基化程度、N-糖基化和O-糖基化位點以及糖鏈的具體結構，並套用到正常人hCG和生殖細胞癌症病人hCG的糖基化比較研究中，證實病人的hCG發生了過糖基化。通過生物膜光干涉技術比較了正常hCG和過糖基化hCG對多組抗體免疫親和作用的差異，找到了親和作用明顯受hCG糖基化影響和基本不受hCG糖基化影響的兩種抗體。使用氫/氘交換技術結合質譜分析確證了這兩種抗體在hCG上的抗原決定簇，分析了他們與hCG的N-糖基化位點的空間位置關係。研究結果發表SCI論文4篇，參與發表SCI論文2篇，同時還有2篇SCI論文正在撰寫、投稿或修回的過程中。申請國家發明專利3項。完成了項目的預期目標。 本項目的研究結果說明質譜是分析蛋白質糖基化及相互作用的有效手段，糖鏈的變化確實會影響蛋白質與其它蛋白的相互作用。下一步將繼續深入地研究糖鏈在腫瘤發生髮展中的機制及如何套用到腫瘤早期診斷和新藥物靶點的發現中。今後的研究在繼續開發和提高質譜分析技術的同時，需要更多地引入糖化學生物學、分子生物學和臨床醫學的交叉學科研究。
