《牛乳主要過敏原α(s1)-酪蛋白關鍵胺基酸致敏特性的研究》是依託北京工商大學，由叢艷君擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：牛乳主要過敏原α(s1)-酪蛋白關鍵胺基酸致敏特性的研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：叢艷君
- 依託單位：北京工商大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
近年來，食物過敏的發生率不斷上升，食物過敏問題已成為全球關注的食品安全問題。乳及乳製品是FAO/WHO認定的導致人類食物過敏的八大類食品之一,也是美國及歐盟新食品標籤法中規定必須標示的過敏原成分之一。α(s1)-酪蛋白是引起牛乳過敏的主要過敏原之一，B細胞表位是過敏原免疫反應基礎。本課題旨在通過固相合成肽的技術構建α(s1)-酪蛋白作用表點陣圖譜，利用抗原抗體特異吸附原理，以牛乳過敏患者血清中的IgE為探針，通過酶聯免疫方法鑑別過敏原的B細胞作用表位，在確定過敏原靶位點的基礎上，通過酶聯免疫的方法識別B細胞表位的關鍵胺基酸，進一步通過糖基化修飾α(s1)-酪蛋白關鍵胺基酸實現降低過敏原致敏性的目的，深入分析胺基酸的致敏特性。本項目為開發低過敏配方粉提出新的理論和方法，對定點修飾蛋白質分子，建立過敏原檢測方法均具有重要的意義。
結題摘要
1建立了α(s1)-酪蛋白多肽圖譜 基於α(s1)-酪蛋白胺基酸序列，套用固相合成肽技術合成α(s1)-酪蛋白多肽圖譜，合成多肽通過高效液相法純化，質譜方法鑑定合成多肽分子量。 2完成酶聯免疫方法鑑別過敏原的B細胞作用表位研究 B細胞作用表位包括IgE作用表位和IgG作用表位。以牛乳過敏患者血清為探針，識別到IgE作用表位為aa126-140, aa6-20，aa76-90，aa171-185和aa11-25。其中aa126-140識別率為100%，aa6-20，aa76-90和aa171-185識別率為83.33%，作用表位aa11-25的識別率為66.67%。IgG作用表位為aa21-35, aa56-70和161-175。 3完成酶聯免疫方法識別B細胞表位關鍵胺基酸的研究。 第19位的天冬醯胺、第22位的精氨酸、第23位的苯丙氨酸為IgE作用表位aa11-25的關鍵胺基酸。識別到IgG作用表位aa21-35的關鍵胺基酸為第22位的精氨酸，第23位的苯丙氨酸和第27位的脯氨酸。IgE作用表位與IgG作用表位具有共同的關鍵胺基酸為第22位的精氨酸，第23位的苯丙氨酸。 4 完成糖基化反應對α(s1)-酪蛋白過敏性影響的研究 我們研究了木糖、果糖、葡萄糖、乳糖、低聚異麥芽糖以及葡聚糖對α(s1)-酪蛋白致敏性的影響，與6種還原糖反應12 h之後抗原降低率達到最大值，葡萄糖在反應進程中活性降低率在6種糖中持續最高，達到90%左右。說明糖基化可以有效降低α(s1)-酪蛋白致敏性。同時測定了α(s1)-酪蛋白接枝度、色澤變化等指標。
