《牙周致病菌誘導的調節性B細胞的生成及分子機制研究》是依託北京大學，由於曉潛擔任負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：牙周致病菌誘導的調節性B細胞的生成及分子機制研究
- 項目負責人：於曉潛
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
牙周炎是因菌斑與機體免疫間的平衡被打破而產生的疾病。牙齦卟啉單胞菌（P. gingivalis）可利用機體的免疫反應改變菌斑構成，進而導致骨吸收。具體機制尚不明確。前期研究表明，與多數細菌的脂多糖（LPS）不同，P. gingivalis LPS可同時活化B細胞的TLR-2和TLR4通路，其所誘導的IL-10(+) Breg不僅出現於傳統的MZ和T2亞群，也出現在T1亞群。這可能有利於P.gingivalis逃避宿主免疫清除並為其它致病菌的增殖創造條件。本研究擬通過流式細胞技術確定P. gingivalis LPS誘導產生的Breg表型，以基因敲除小鼠和TLR PCR Array技術分析TLR2和TLR4途徑在這一過程中的作用及相互影響。通過建立CD19-/-小鼠牙周炎模型及Breg過繼轉移模型，探討P. gingivalis LPS誘導產生的Breg在牙周炎發生和發展中的作用。
結題摘要
牙周炎因菌斑微生態與機體免疫失衡而產生並發展。在牙周菌斑微生態中，牙齦卟啉單胞菌（P. gingivalis）雖然不是優勢菌，但可利用與機體的免疫反應改變齦下微生態，是牙周關鍵致病菌，但其機制尚不明確。作為P. gingivalis的主要致病因素，其脂多糖（LPS）可同時活化B細胞的TLR-2和TLR-4通路，所誘導產生的具有免疫抑制功能的調節性B細胞（Breg）也可能具有不同於傳統Breg的表型與特徵。 本研究通過體外培養陰選的小鼠脾臟B細胞，對P. gingivalis LPS所誘導產生的Breg表型和產生IL-10的能力進行了檢測。結果顯示，(1) P. gingivalis可減少B細胞中早期凋亡細胞的比例，這一作用依賴於TLR-2和TLR-4通路下調Caspase 4和Caspase 9；(2)與大腸桿菌（E. coli）LPS相比，P. gingivalis LPS不能完全活化樹突狀細胞；(3)CD5+CD1d(hi)仍然是區分P. gingivalis LPS誘導產生的Breg的很好的標記物，但也僅占IL-10(+)細胞的42.1%（以CD5+IgM(hi)表型可界定IL-10(+) B細胞的20.9%）；(4)通過對細胞因子mRNA進行檢測，證實P. gingivalis LPS誘導產生的Breg主要表現為Th2反應；(5)與E. coli LPS不同，P. gingivalis LPS可上調B細胞p35 mRNA的表達，還需進一步證實其對Breg及Treg的影響。在體內實驗部分，我們通過過繼轉移分別檢測了P. gingivalis LPS 誘導生成的CD5+CD1d(hi) B細胞及CD5+IgM(hi)B細胞對小鼠實驗性牙周炎的影響。初步結果表明，(1)二者均可有效抑制牙周炎骨吸收；(2)病損部位的RANKL表達降低，p35與IL-10均有顯著增高。 P. gingivalis LPS可通過TLR-2和/或TLR-4途徑誘導產生Breg。與經典Breg類似，它主要來自於B-1a亞群，p35是其擴增過程中重要的正反饋途徑。
