《激活α7nAChR抗肝臟缺血再灌注損傷作用及其機制》是依託同濟大學，由沈甫明擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：激活α7nAChR抗肝臟缺血再灌注損傷作用及其機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：沈甫明
- 依託單位：同濟大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
迷走神經遞質乙醯膽鹼(ACh)能夠激活α7尼古丁乙醯膽鹼受體(α7nAChR)；激活α7nAChR能抑制多因素所致的肝損傷；枯否細胞功能影響肝缺血再灌注 (HIR) 損傷。我們假設肝迷走神經遞質ACh經激活枯否細胞α7nAChR減輕HIR損傷。利用切除肝迷走神經小鼠、清除枯否細胞小鼠、α7nAChR-/- 小鼠製作HIR模型，分離培養小鼠枯否細胞和肝細胞，擬從以下5個方面進行驗證：1、激活α7nAChR減輕HIR損傷；2、 α7nAChR-/-加重HIR損傷；3、肝迷走神經切除加重HIR損傷，預激活α7nAChR阻止這一損傷；4、清除枯否細胞減輕HIR損傷；5、枯否細胞α7nAChR介導抗HIR損傷可能機制。該項目試圖明確肝迷走神經在抗HIR損傷的作用，並探索枯否細胞α7nAChR作為抗HIR損傷靶點的可能性，從而為臨床HIR損傷的預防提供新思路。
結題摘要
目的：肝臟缺血再灌注損傷是肝外科手術的併發症之一。大約有50%的肝細胞在再灌注24小時內經歷凋亡。迷走神經釋放的遞質乙醯膽鹼能夠激活巨噬細胞(肝臟的巨噬細胞即為枯否氏細胞)α7尼古丁乙醯膽鹼受體(α7nAChR)。枯否氏細胞(KCs)功能影響肝臟缺血再灌注損傷。我們假設：肝臟迷走神經通過激活KCs表面的α7nAChR，能夠減輕肝臟缺血再灌注所致的損傷。 方法：利用肝臟迷走神經切除和完整的C57小鼠、肝臟巨噬細胞清除和保留的C57小鼠、以及α7nAChR基因敲除和其野生型小鼠，製作肝臟缺血再灌注模型；細胞水平則利用原代分離的KCs和肝細胞進行缺氧/復氧單獨培養，或者共培養。對肝臟損傷指標、肝細胞凋亡情況、ROS和可溶性CD163等指標進行觀察和測定。 結果：和對照組比較，肝臟迷走神經切除和α7nAChR基因敲除均可使缺血再灌注誘導的血清ALT水平、肝臟Caspase-3和8活性顯著升高；激活α7nAChR可在野生型小鼠減輕這些變化，在該基因敲除小鼠則無效；此外，激活α7nAChR可減輕肝臟迷走神經切除小鼠因缺血再灌注所致的肝臟損傷和肝細胞凋亡。在體外，激活α7nAChR能夠減輕缺氧/復氧導致的肝細胞和KCs共培養體系中的肝細胞凋亡；激活α7nAChR和過氧化氫酶均能夠抑制缺氧/復氧導致的KCs產生過量ROS和H2O2；α7nAChR激動劑和過氧化氫酶預處理的KCs上清液，能夠減輕缺氧/復氧導致的肝細胞凋亡。KCs清除降低缺血再灌注所致的小鼠肝組織H2O2含量。無論在缺血再灌注小鼠，還是在缺氧/復氧的KCs，激活α7nAChR均導致可溶性CD163顯著下降。 結論：迷走神經遞質乙醯膽鹼通過激活肝臟KCs的α7nAChR，能夠減輕肝臟缺血再灌注損傷，其機制與抑制過量ROS產生相關。
