《漢灘病毒結構蛋白抗原表位的系統鑑定及其套用研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由金伯泉擔任項目負責人的重點項目。
基本介紹
- 中文名：漢灘病毒結構蛋白抗原表位的系統鑑定及其套用研究
- 項目類別：重點項目
- 項目負責人：金伯泉
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
CD8+T細胞(CTL)和CD4+T細胞在抗病毒免疫中均起著重要作用。但目前對引起腎綜合徵出血熱(HFRS)的漢灘病毒(HTNV)特異性T細胞免疫應答的研究僅限於數個核蛋白（NP）特異性CTL表位。我們前期發現23個新的HTNV-NP T細胞表位，其細胞免疫應答與免疫保護有關。本項目擬採用覆蓋HTNV-NP和糖蛋白（G1、G2）全長的部分重疊肽和ELISPOT技術，系統鑑定出NP、G1和G2上的CD4+和CD8+T細胞表位。並挑選其中的免疫優勢表位，用胞內細胞因子染色、流式細胞術和四聚體等技術，搞清HFRS患者中表位特異的T細胞頻率、增殖、殺傷和分泌細胞因子的變化及其與病情、病程的相互關係。同時鑑定HTNV結構蛋白上的B細胞表位，尤其是免疫優勢表位及中和抗體表位。深入闡明HTNV感染後適應性免疫應答產生的規律及其與免疫保護或免疫損傷的關係，並為新型HTNV疫苗的設計提供重要的理論依據。
結題摘要
本課題在前期研究結果基礎之上，鑑定出5個HLA-I類分子限制的HTNV-NP CTL表位，發現HLA-A2和-B35限制的HTNV-NP表位特異性CTL應答頻率在急性期輕型/中型患者中明顯高於重型/危重型患者。表位特異性CTL的增殖能力以及分泌IFN-γ水平與HFRS疾病病情呈負相關，提示其參與抗病毒作用；X射線晶體衍射顯示HLA-B3501/VY-9和HLA-A0201/FA-9整體結構是典型的MHC構象。系統鑑定出HTNV-Gn/Gc上T細胞表位，探討了Gn/Gc特異性CD4+ T細胞應答的抗病毒作用及其機制；初步篩選出一組HLA-A2限制的HTNV-Gn/Gc上CTL 9肽表位，為闡明HTNV感染後細胞免疫應答產生的規律及其免疫保護作用的機制，並為新型HTNV基因和多肽疫苗的設計提供重要的理論依據。鑑定出3D8鼠源性中和活性單抗識別HTNV-Gn/Gc的表位肽胺基酸序列並篩選出其中的關鍵胺基酸，為闡明具有治療作用的3D8單抗的作用機制提供了重要依據。建立了一步法檢測HFRS患者血清HTNV RNA病毒載量方法，發現HFRS患者血漿標本中HTNV RNA載量隨病程逐漸下降，並且患者血漿中HTNV病毒載量與病情和病程相關。拓展了重要免疫分子與HFRS發病的關係的研究，發現HFRS患者血清高水平CXCL10與病情相關，HFRS患者CD100表達變化水平與疾病明顯相關，為下一步深入研究HTNV感染的HFRS發病機制以及免疫應答規律提供了基礎。
