《清道夫受體在對蝦先天免疫防禦中的功能研究》是依託山東大學，由王金星擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：清道夫受體在對蝦先天免疫防禦中的功能研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：王金星
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
對蝦養殖是我國沿海地區重要的產業，而由細菌和病毒等導致的對蝦病使該養殖業蒙受巨大損失。目前對蝦感染性疾病控制的方法尚不能滿足生產需求。清道夫受體（SRs）是一種重要的模式識別受體，在先天免疫中發揮關鍵作用，具有吞噬、清除凋亡細胞和病原微生物等作用，然而迄今為止，清道夫受體在對蝦中鮮有報導。本項目擬對在對蝦轉錄組分析的基礎上得到的多種SRs進行性質與功能研究:包括鑑定對蝦中存在的不同類型的SRs；分析它們的組織分布和病原感染後的表達模式；利用重組表達或天然的SRs研究其所結合的體內配體和病原微生物來源的體外配體；揭示SRs相互作用的蛋白以及這種相互作用與病原清除和吞噬的關係，闡明SRs與配體結合後所激活的免疫相關信號途徑和調控的效應作用及效應分子。該研究在理論上可以豐富對蝦先天免疫的理論，在實踐上可以為對蝦養殖中的疾病防治提供新靶標和新思路。
結題摘要
模式識別受體對病原微生物的識別是先天免疫啟動的關鍵步驟。在對蝦中已發現十幾種模式識別受體，但對清道夫受體及其功能報導的很少。本項目以日本囊對蝦為材料，對清道夫受體進行了篩選、鑑定和功能分析。主要結果如下：(1)通過轉錄組測序和生物信息學分析，發現和鑑定了清道夫受體(SR)家族的A、B、C、D和F五個亞家族共8種SR分子，包括A、C、D和F亞家族各1種及B亞家族的 4種SRs。並對其組織分布和表達模式進行初步分析。在此基礎上對SR-B和C的抗細菌和抗病毒免疫機理進行了系統研究。(2)清道夫受體B1 (MjSR-B1)在對蝦抗細菌免疫中發揮重要作用：在對蝦受到細菌刺激後，血細胞中MjSR-B1的mRNA表達上調。其重組蛋白可以結合和凝集革蘭氏陽性菌和陰性菌。 通過RNA干擾和過表達實驗證明MjSR-B1可以通過促進血細胞的吞噬和增強抗菌肽的表達參與對蝦的抗細菌免疫。(3)清道夫受體C (MjSR-C)通過增強對蝦血細胞的吞噬作用介導宿主的抗病毒免疫：當對蝦受到白斑綜合徵病毒（WSSV）的刺激後， MjSR-C在mRNA以及蛋白水平呈顯著的上調錶達。RNA干擾和過表達實驗顯示MjSR-C具有抗WSSV感染的功能。進一步的機理研究表明MjSR-C可以與WSSV的囊膜蛋白相互作用。對蝦感染WSSV後，MjSR-C形成三聚體介導病毒的內吞，其胞內域與beta-Arrestin2相互作用，WSSV通過MjSRC-Arrestin-Clathrin途徑完成對病毒的內吞，形成的內吞小體與溶酶體融合而清除病毒。這是首次報導SR-C作為一種模式識別受體參與對病毒的吞噬和清除。(4) MjSR-C作為模式識別受體也參與了對細菌識別和清除：當對蝦受到細菌刺激以後，MjSR-C的表達在血細胞中顯著上調錶達。MjSR-C的胞外域具有結合不同細菌以及細菌來源多糖的能力。敲低MjSR-C的表達，對蝦血細胞的細菌清除能力和吞噬率顯著下降。此外，MjSR-C具有調節抗菌肽基因表達的功能。綜上所述，MjSR-C通過增強對蝦的細胞和體液免疫有效地保護對蝦免受細菌的侵染。另外，我們還研究了beta-Arrestins等基因在免疫信號調控中的功能。該研究豐富了無脊椎動物先天免疫理論，為對蝦養殖的病害防治提供了新思路和新靶標。
