《流體切應力在妊娠高血壓發病機制中的作用》是依託上海交通大學，由張萍擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：流體切應力在妊娠高血壓發病機制中的作用
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張萍
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
本研究擬選用亞硝基左旋精氨酸甲酯（L-NAME）誘導大鼠妊娠高血壓模型，以孕鼠和同齡雌鼠為對照，選用中小血管的代表頸總動脈，從血管力學生物學的角度，對妊娠高血壓疾病的發病機制進行研究。首先檢測妊娠高血壓模型、正常孕鼠和同齡未孕雌鼠頸總動脈的血流量、動脈幾何形態學、血液粘度和血漿神經肽Y（NPY）濃度，計算動脈的平均切應力變化；通過血管形態結構、血管成分及凋亡/增殖比率所反應的功能變化，探討力學因素的改變是否導致血管重建。套用離體頸總動脈內皮細胞和血管平滑肌細胞聯合培養技術，在培養中模擬妊娠高血壓血漿NPY的濃度和平均切應力大小，檢測與血管重建的相關指標，綜合分析應力條件與NPY在血管重建中的作用及相互機制。利用差異蛋白質組學技術結合生物信息學分析，尋找在體情況下參與切應力對NPY在血管重建中起調控作用的關鍵蛋白。研究結果將為妊娠高血壓的臨床預警、診斷與治療提供力學生物學的新依據。
結題摘要
本課題採用L-NAME誘導、製備妊娠高血壓模型，以正常孕鼠為對照，用無創鼠尾血壓測量儀測量血壓，確認L-NAME妊娠高血壓模型複製成功；採集大鼠血標本，放免測定靜脈血漿中NPY含量；對頸總動脈及胸主動脈組織進行形態學（包括壁厚內徑比）、組織成分、細胞增殖及張開角的檢測，通過對血流、血粘度及壁厚的測量結果，利用公式計算出切應力,比較孕鼠與妊娠高血壓平均血流切應力的不同，分析動脈重建程度。體外培養VSMCs，靜態條件下給予不同濃度的NPY刺激，WST方法及PCNA指標檢測細胞增殖情況，細胞劃痕實驗檢測細胞增殖能力變化； 運用Western blotting方法檢測胸主動脈和靜態NPY刺激VSMCs細胞後的NPY 受體（Y1、Y2、Y5）及其信號通路的相關轉錄因子的變化（STAT3, c-Fos）。結果顯示：製備成功的妊娠高血壓模型與正常孕鼠相比較，血粘度增加，血流降低，頸總動脈切應力降低；在對血管組織形態學觀察方面血管壁厚無統計學差異，而表示血管特性的張開角無論是在頸總動脈還是胸主動脈都有顯著性差異；動物模型中血漿NPY含量增加，胸主動脈PCNA、Y5 受體表達增加，P-STAT3 727、c-Fos 明顯增加；NPY靜態刺激VSMCs後，細胞中Y1、Y5受體表達增加，並激活P-STAT3 705、727以及c-Fos，促進細胞的增殖與遷移。這些結果提示：妊娠高血壓大鼠發生了動脈重建，力學環境發生了改變。這一過程可能是由於血漿中NPY濃度的增加刺激Y5受體的表達增加，激活STAT3與c-Fos信號通路誘導VCMCs增殖，發生了血管重建。體外VSMCs的增殖與遷移，則是通過Y1、Y5受體共同作用，激活STAT3與c-Fos信號通路而完成的。
